AO0060 - Apresentação Oral
Área: 7 - Estomatologia

Acetilação de histona H3 e sua associação com eventos iniciais da tumorigênese em linhagens de queratinócitos orais displásicos e tumorais
Barbeiro CO, Fernandes D, Almeida LY, León JE, Bufalino A
Diagnóstico e Cirurgia - UNIVERSIDADE ESTADUAL PAULISTA - ARARAQUARA
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse

As desordens potencialmente malignas orais (DPMOs) são doenças com risco elevado para desenvolver câncer na cavidade oral. Estudos recentes sugerem que o infiltrado inflamatório associado às DPMOs pode relacionar-se com sua etiologia e comportamento clínico, bem como, atuar como fator indutor de alterações epigenéticas. Assim, avaliar o perfil molecular e epigenético destas lesões colaboraria para o melhor entendimento do processo de transformação maligna, melhorando a eficácia na identificação de pacientes com maior risco. O objetivo deste estudo foi avaliar se os níveis de acetilação de histona H3 em linhagens celulares displásicas e tumorais sofrem alterações pelo contato com as células mononucleares do sangue periférico (PBMCs) e avaliar se tais alterações são acompanhadas de modificações na proliferação celular e na transição epitélio-mesenquimal (TEM). Foram realizados ensaios de co-cultura celular de PBMCs com linhagens de queratinócitos orais (NOK-SI, DOK, SCC-25 e Detroit 562) para avaliar a influência dos PBMCs na aquisição de vantagens para a progressão tumoral.
Os resultados revelaram que a co-cultura foi capaz de favorecer a TEM, sugerindo que tanto queratinócitos orais displásicos como tumorais são capazes de liberar fatores que modulam o imunofenótipo de PBMCs conferindo o ganho de vantagens na tumorigênese.
(Apoio: FAPs - Fapesp  N° 2018/04954-2)

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AO0062 - Apresentação Oral
Área: 7 - Imaginologia

Influência do tamanho de voxel e do método de segmentação de imagens de micro-CT na avaliação do preenchimento de canais radiculares
Torres FFE, Pinto JC, Lucas-Oliveira E, Bonagamba TJ, Guerreiro-Tanomaru JM, Tanomaru-Filho M
Odontologia Restauradora - UNIVERSIDADE ESTADUAL PAULISTA - ARARAQUARA
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse

Este estudo analisou a influência do método de segmentação e do tamanho de voxel na avaliação da presença de vazios em canais radiculares obturados por diferentes cimentos. Canais mesiais curvos de molares inferiores extraídos foram preparados por HyFlex EDM 25/.08 e obturados com Bio-C Sealer ou AH Plus, pela técnica de cone único. Após escaneamento em microtomografia computadorizada (micro-CT. SkyScan 1272) a 5 µm, a porcentagem volumétrica de vazios foi avaliada em imagens reconstruídas a 5, 10 e 20 µm. Escolheu-se comparar a segmentação visual das imagens, realizada por dois examinadores, e a segmentação automática. Análise radiográfica da radiopacidade dos cimentos (mm Al) foi realizada. Os dados foram submetidos aos testes ANOVA/Tukey e teste-t (α=0.05). AH Plus apresentou a maior radiopacidade (P<0.05). Para todos os tamanhos de voxel avaliados, não houve diferença entre os observadores, que foram semelhantes aos resultados obtidos com a segmentação automática (P>0.05). Os canais radiculares preenchidos com AH Plus ou Bio-C apresentaram porcentagem semelhante de vazios (P>0.05).
Conclui-se que os métodos de segmentação visual e automática podem ser aplicados às imagens de micro-CT adquiridas entre 5 e 20 µm, para avaliação da presença de vazios em canais radiculares obturados. A segmentação automática deve ser considerada por ser um método mais rápido e sem influência do operador. Bio-C Sealer e AH Plus apresentam similar capacidade de preenchimento de canais curvos.
(Apoio: FAPs - Fapesp  N° 2016/00321-0, 2018/19665-6, 2017/19049-0  |  CAPES  N° 001)

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AO0063 - Apresentação Oral
Área: 3 - Controle de infecção / Microbiologia / Imunologia

Bioprospecção de produtos naturais como fotossensibilizadores em terapia fotodinâmica contra Staphylococcus aureus e Candida albicans
Oliveira AB, Ferrisse TM, Annunzio SR, Franca MGA, Silva MGV, Cavalheiro AJ, Fontana CR, Brighenti FL
Clinica Infantil - UNIVERSIDADE ESTADUAL PAULISTA - ARARAQUARA
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse

A resistência bacteriana causada pelo uso indiscriminado de antibióticos é um dos maiores problemas mundiais. Assim, pesquisas com o objetivo de estudar novos tratamentos para infecções devem ser motivadas. Nesse contexto, a terapia fotodinâmica antimicrobiana (TFDa) é considerada uma terapia alternativa eficaz e promissora. O objetivo deste estudo foi avaliar o potencial in vitro de óleos essenciais e extratos vegetais como fotossensibilizadores em TFDa. Staphylococcus aureus ATCC 25923 e Candida albicans ATCC 90028, bem como três óleos essenciais (Coffea arabica, Eugenia uniflora e Matricaria recutita) e três extratos vegetais (Senna splendida, Senna reticulata e Senna macranthera) foram utilizados. O resultado da TFDa foi avaliado por meio da contagem de células viáveis após o tratamento. A produção de espécies reativas de oxigênio (EROs) foi avaliada por meio da utilização de sondas específicas. A citotoxicidade dos materiais vegetais foi avaliada utilizando queratinócitos orais e o teste MTT. Significância estatística foi considerada para α<0,05. Foi observada redução microbiana total para ambas as espécies microbianas em 4 dos 6 compostos testados, sendo que os extratos vegetais de S. macranthera e S. reticulata produziram maior quantidade de EROs e apresentaram maior viabilidade celular dos queratinócitos quando expostos a luz em relação aos demais compostos naturais.
Os resultados do presente estudo mostraram que a TFDa mediada por diferentes compostos naturais foi eficiente contra suspensões microbianas de S. aureus e C. albicans.
(Apoio: Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)   N° 2018184400  |  CAPES  N° 001)

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AO0065 - Apresentação Oral
Área: 3 - Fisiologia / Bioquimica / Farmacologia

Eugenia selloi reduz a migração de neutrófilos no processo inflamatório: elucidação do mecanismo de ação
Franchin M, Lazarini JG, Massarioli AP, Soares JC, Cunha GA, Mariano RC, Alencar SM, Rosalen PL
Ciências Fisiológicas - UNIVERSIDADE FEDERAL DE ALFENAS
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse

Investigou-se a composição fitoquímica e o mecanismo de ação anti-inflamatório da subfração purificada (S8) de Eugenia selloi. Os frutos da E. selloi (SisGen # AD4B64F) foram coletados em Campina de Monte Alegre (S23º53'57.06";W48º51'24.68"), SP, Brasil. A S8 foi obtida por subfracionamento em coluna com fase reversa C18 e o seu perfil químico determinado por LC-ESI-QTOF-MS. Os estudos in vitro foram realizados em cultura de RAW 264.7, onde avaliou-se a ativação do NF-κB e níveis de citocinas. Os estudos in vivo foram realizados em camundongos C57BL/6, n=5 (CEUA/UNICAMP # 4371-1) e os seguintes ensaios foram aplicados: migração de neutrófilos, microscopia intravital e expressão de ICAM-1. A toxicidade da S8 foi determinada em larvas de Galleria mellonella. Para a análise estatística utilizou-se ANOVA (Tukey, p<0.05). De acordo com os resultados, na composição química da S8 foram identificados isômeros dos compostos quercetrina, ácido vanílico e ácido cumárico. Nos testes anti-inflamatórios in vitro verificou-se que a S8 (10-100μg/mL) reduziu a ativação de NF-κB e os níveis de TNF-α e CXCL2/MIP-2. Os ensaios in vivo mostraram que o tratamento via oral com S8 (3-10mg/kg) reduziu o rolamento, adesão e migração de neutrófilos no processo inflamatório, bem como a expressão de ICAM-1. Por fim, a S8 (0,1-10mg/kg) não apresentou toxicidade em G. mellonella.
A S8 de E. selloi é uma fonte promissora de compostos bioativos que podem ser aplicados em diferentes setores como o agronegócio, as indústrias farmacêutica e alimentícia propiciando novos produtos para a saúde humana.
(Apoio: FAPs - Fapesp  N° 2016/02926-6 e 2017/09898-0)

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AO0066 - Apresentação Oral
Área: 3 - Cariologia / Tecido Mineralizado

Efeito da combinação da exposição diurna à sacarose com a noturna à lactose na desmineralização do esmalte
Vieira JC, Cury JA, Ricomini-Filho AP
Odontologia - FACULDADE DE ODONTOLOGIA DE PIRACICABA
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse

A associação do leite humano e o aumento do risco de cárie em crianças com amamentação prolongada poderia ser explicada por dieta cariogênica diurna combinada à fermentação noturna de lactose, condição avaliada neste estudo experimental. Biofilmes de S. mutans UA159, formados sobre blocos de esmalte bovino com dureza de superfície (DS) conhecida, foram expostos 8x/dia, 3 min à sacarose 10% (dieta diurna cariogênica), ou a solução de NaCl 50 mM. Em seguida, foram expostos ao meio com lactose a 0,7% por 2 h (retenção noturna do leite na boca) ou somente ao meio. Foram avaliadas 4 condições (n=12): Ctr, controle negativo; Lac, exposição noturna à lactose; Sac, exposição diurna à sacarose; e Sac→Lac, exposição diurna à sacarose seguida de exposição noturna à lactose. O meio foi trocado 3x/dia, no início do dia, após os tratamentos diurno e noturno, sendo avaliado o pH. Após 96 h, os biofilmes foram coletados para avaliar células viáveis (UFC), biomassa e polissacarídeos extracelulares (PEC). A porcentagem de perda de DS (%PDS) foi calculada. Os dados foram analisados por ANOVA um critério e teste de Tukey (α=5%). A %PDS diferiu entre os grupos (p<0,05), sendo maior em Sac→Lac (40,6 ± 6,8) quando comparada aos demais, Sac (32,1 ± 7,2), Lac (6,6 ± 4,5) e Ctr (2,4 ± 3,1). Apenas o grupo Ctr apresentou menores contagens de UFC (p<0,05). Para biomassa e PEC, os grupos Sac→Lac e Sac apresentaram valores semelhantes (p>0,05), mas superiores a Lac e Ctr (p<0,05).
Os dados sugerem que biofilme formado sob exposição diurna à sacarose pode aumentar a cariogenicidade da exposição noturna à lactose.
(Apoio: CNPq  N° 430224/2018-4  |  FAPEMA  N° 08790/17)

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AO0067 - Apresentação Oral
Área: 3 - Controle de infecção / Microbiologia / Imunologia

Avaliação do efeito fototóxico de diferentes comprimentos de onda de luz LED sobre a expressão da topoisomerase II de Staphylococcus aureus
Jordão CC, Sousa TV, Dias LM, Carmello JC, Klein MI, Pavarina AC
Materiais Odontológicos e Prótese - UNIVERSIDADE ESTADUAL PAULISTA - ARARAQUARA
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse

Staphylococcus aureus é uma das espécies mais prevalentes em infecções nosocomiais. A instalação dessa bactéria em implantes médicos e no tecido do hospedeiro, associada a formação de um biofilme maduro representa um desafio para o sistema de saúde. Assim, a fototerapia é uma modalidade de tratamento para essa condição, seu mecanismo de ação consiste na produção de espécies reativas de oxigênio que são capazes de promover a inativação celular. A enzima topoisomerase II (TOPO II) é alvo bacteriano vital para replicação, transcrição, recombinação e reparo do DNA. Dessa forma, o presente estudo avaliou a ação da fototerapia mediada por LED nos diferentes comprimentos de onda e doses de luz sobre a expressão gênica da TOPO II em S. aureus. Suspensões padronizadas de S. aureus foram submetidas aos tratamentos com luz LED: para o LED azul (455 nm): 15 e 50 J/cm²; vermelho (660 nm): 5 e 50 J/cm²; amarelo (590 nm): 0,1 e 10 J/cm² e branco (multicromático): 300 lux e 500 lux. A quantificação da expressão gênica foi realizada por "Reverse Transcription-Quantitative Polymerase Chain Reaction" (RT-qPCR) usando primer específico para TOPO II. Os dados obtidos foram submetidos a ANOVA um critério fixo, seguido pelo pós-teste de Tukey (p≤0.05). Os resultados demonstraram que as duas doses de luz azul e luz vermelha diminuíram a expressão de topo II (p≤0.0001). As luzes amarela e branca, promoveram aumento significativo na expressão dessa enzima.
Podemos concluir que os diferentes comprimentos de onda de luz LED utilizados para o tratamento afetam a expressão da enzima TOPO II em S. aureus.
(Apoio: CNPq  N° 47721  |  Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo-FAPESP  N° 2017/02559-6  |  Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo-FAPESP  N° 2016/13868-7)

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AO0068 - Apresentação Oral
Área: 3 - Cariologia / Tecido Mineralizado

Otimização dos parâmetros da técnica direta usando EIE para determinação de fluoreto em dentifrícios à base de Na₂FPO₃/CaCO₃ e NaF/SiO₂
Miranda LFB, Tabchoury CPM, Cury JA
Prótese e Periodontia - FACULDADE DE ODONTOLOGIA DE PIRACICABA
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse

Esse trabalho avaliou se os parâmetros estabelecidos no protocolo de Cury et al. (Braz Dent J. 2010;21:396-400) para a determinação da concentração de fluoreto total (FT) e fluoreto solúvel total (FST) em dentifrícios com eletrodo íon-específico (EIE) pela técnica direta poderiam ser flexibilizados. Foram avaliados os efeitos do(a): (i) concentração da suspensão de dentifrício preparada (0,25% a 4%; p/v) em FT; (ii) velocidade de centrifugação (1.000 a 12.000 g por 10 min) e (iii) tempo de centrifugação (1 a 10 min a 1.000 e 3.000 g) em FST no sobrenadante e (iv) tempo de incubação (15 a 60 min a 45 °C) para hidrólise de monofluorfosfato (FPO₃^2-) e dissolução de F-insolúvel (F-ins). A amostra consistiu em dentifrícios à base de Na₂FPO₃/CaCO₃ fresco e envelhecido (1.450 µg F/g) e NaF/SiO₂ (1.100 µg F/g) (n=9 repetições). Os resultados foram expressos em μg F/g ou % de FPO₃^2- hidrolisado e F-ins dissolvido. Os dados foram analisados por análise de variância um fator e teste de Tukey. A concentração de FT encontrada diminuiu com o aumento da concentração da suspensão de dentifrício (p<0,05). Para formulações de Na₂FPO₃/CaCO₃, a centrifugação a 1.000 g por 5 min foi suficiente para precipitar F-ins (p>0,05) e 99% de FPO₃^2- foi hidrolisado e 97% de F-ins dissolvido com 30 min de incubação.
A validade dos parâmetros do protocolo foi confirmada e podem ser flexibilizados, permitindo aumentar a amplitude da concentração da suspensão de dentifrício e reduzir a velocidade, tempo de centrifugação e tempo de incubação para formulações de Na₂FPO₃/CaCO₃ sem prejuízos à determinação de FT e FST.
(Apoio: CAPES  N° 88882.329875/2019-01  |  CNPq  N° 435955/2018-7)

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AO0069 - Apresentação Oral
Área: 3 - Fisiologia / Bioquimica / Farmacologia

Comparação termográfica do comportamento dos músculos temporal e masseter entre gêneros em atletas de Crossfit® na avaliação de força molar
Cardoso AHLS, Fioco EM, Fabrin SCV, Gomes GGC, Silva NS, Prandi MVR, Verri ED, Regalo SCH
Biologia Básica e Oral - UNIVERSIDADE DE SÃO PAULO - RIBEIRÃO PRETO
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse

A termografia é um método diagnóstico que estabelece aplicações distintas na odontologia e no esporte. As exigências atléticas necessitam de ajustes fisiológicos específicos que podem refletir em alterações térmicas. Esse trabalho objetivou comparar, por meio da termografia, o comportamento dos músculos do sistema estomatognático entre gêneros em atletas de Crossfit® na avaliação de força molar. Para tanto, foram avaliados 14 atletas, experientes na modalidade, divididos em 2 grupos: 7 homens (GH) e 7 mulheres (GM). A avaliação termográfica foi feita após a avaliação da força molar bilateral, a câmera utilizada foi uma Flir modelo C2, no momento da coleta o laboratório estava com uma temperatura média de 25ºC e umidade relativa do ar de 73%. A regiões de interesse foram: músculo temporal direito (TD), temporal esquerdo (TE), masseter direito (MD) e masseter esquerdo (ME). Para coleta das imagens termográficas, se respeitou uma distância de 1,5m e se registrava 3 imagens nas hemifaces. Para análise estatística, empregou-se o teste t. Os resultados mostraram o seguinte comportamento térmico. GH: TD 35,81º ± 1,57; TE 35,35º ± 1,76; MD 35,02º ± 1,95 e do ME 35,61º ± 1,83) e GM: TD 36,80º ± 0,79; TE 36,92º ± 0,49; MD 35,77º ± 0,77 e ME 35,74º ± 0,56), foi observado uma discrepância significativa, apenas no músculo TE, pois o GM apresentou valores maiores de temperatura (1,57º) em relação ao GH, para as demais variáveis não houve diferença significativa.
Foi possível concluir que, apesar da dominância funcional, acontece um equilíbrio térmico bilateral entre os gêneros.

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AO0071 - Apresentação Oral
Área: 3 - Cariologia / Tecido Mineralizado

Ação protetora do TiF₄ na desmineralização da dentina sob modelo de biofilme microcosmo simulando efeito da radioterapia de cabeça-pescoço
Souza BM, Silva MS, Braga AS, Bueno PSK, Santos PSS, Buzalaf MAR, Magalhães AC
Ciências Biológicas - UNIVERSIDADE DE SÃO PAULO - BAURU
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse

Este trabalho avaliou o efeito do verniz de TiF₄ em relação ao desenvolvimento da cárie radicular simulando paciente submetido à radioterapia de cabeça e pescoço (RCP), em modelo de biofilme microcosmo. Amostras de dentina radicular bovina foram preparadas, irradiadas (70 Gy) e tratadas com um dos agentes: verniz TiF₄ a 4%; verniz NaF a 5,42%; verniz placebo (sem F^-); solução de diamino fluoreto de prata (SDF) a 30%; sem tratamento (controle) por 6h. As amostras foram submetidas à formação do biofilme microcosmo (5 dias, 37^o C, 5% CO₂) a partir do biofilme removido de raízes dentárias de pacientes submetidos à RCP. As variáveis de resposta foram viabilidade do biofilme por fluorescência, contagem de UFC para bactérias cariogênicas, produção de ácido lático e quantificação da perda mineral (microradiografia transversal). Todos os dados foram comparados usando ANOVA/Tukey (p<0,05). TiF₄ e SDF reduziram significativamente a viabilidade do biofilme comparados ao controle, porém somente o SDF diferiu do placebo. O TiF₄ foi o único agente capaz de reduzir a contagem de UFC para microrganismos totais, enquanto o SDF conseguiu reduzir significativamente a UFC para Estreptococos totais e S. mutans, comparados ao placebo e controle. Os biofilmes das amostras tratadas com vernizes fluoretados apresentaram redução na produção de ácido lático em comparação ao controle. O TiF₄ e SDF reduziram significativamente a perda mineral comparados aos demais grupos, os quais não diferiram entre si.
O verniz de TiF₄ apresentou efeito anti-cárie compatível ao SDF neste modelo experimental.
(Apoio: FAPs - FAPESP  N° 2019/07241-0  |  FAPs - Fapesp  N° 2019/21797-0)

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AO0072 - Apresentação Oral
Área: 3 - Cariologia / Tecido Mineralizado

Maioria dos dentifrícios brasileiros comercializados para crianças apresentam fluoreto biodisponível para interferir com a cárie dental
Valdivia-Tapia AC, Costa RCNP, Leite-Filho AM, Miranda LFB, Cury JA
Ciencias Fisiologicas - FACULDADE DE ODONTOLOGIA DE PIRACICABA
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse

Para serem eficazes no controle da cárie, dentifrícios devem conter fluoreto solúvel total (íon F + íon FPO₃^2-) em concentração de 1000 ppm F (mg F/kg) ou acima. O objetivo foi determinar as concentrações de fluoreto total (FT = FST + F insolúvel) e de FST em dentifrícios comercializados no Brasil para crianças. Vinte e quatro marcas foram encontradas no mercado e de acordo com o rótulo: 19 foram formulados com NaF/SiO₂ (16 com 1100, um com 1000, um com 995, e um com 500 ppm F); 3 com Na₂FPO₃/CaCO₃ (900, 1100, e 1179 ppm F) e 2 com Na₂FPO₃/SiO₂ (1000 e 1100 ppm F). De cada marca foram comprados 2-3 tubos e a análise foi feita em duplicata. Cada amostra foi pesada (90 a 110 mg) e homogeneizada em 10 mL de água purificada. A concentração de FT foi determinada na suspensão do dentifrício e FST no sobrenadante, de acordo ao protocolo validado (Cury et al., 2010), porém, HCl não foi usado nas análises dos dentifrícios formulados com NaF/SiO₂. O fluoreto foi determinado usando o EIE através da técnica direta, e os resultados expressos em ppm F (mg F/kg). A concentração de FT encontrado (476-1098 ppm F) foi próxima daquelas declaradas no rótulo (500-1179 ppm F). FST encontrado (481-1110 ppm F) foi próximo do FT encontrado (média de 0.7% de diferença) para dentifrícios formulados com SiO₂, contendo NaF ou Na₂FPO₃. Entretanto, nos dentifrícios formulados com CaCO₃, cerca de 21% do FT estava insolúvel (sem potencial anticárie).
Em conclusão, 83% dos dentifrícios vendidos em Brasil para crianças apresentam concentração de fluoreto solúvel potencialmente biodisponível para ser eficaz no controle de cárie.
(Apoio: CNPq  N° 131732/2019-6; 435955/2018-7  |  CAPES  N° 001; 88882.329875/2019-01; 88882.445799/2019-01; 88887.341996-00  |  FUNCAMP  N° Conv. 4887.1 e 65/91)

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