PN0014 - Painel Aspirante
Área: 3 - Controle de infecção / Microbiologia / Imunologia

Desenvolvimento e ação antibiofilme de um nanocarreador de cloreto de cetilpiridínio
Caldeirão ACM, Araujo HC, Arias LS, Souza Neto FN, Camargo ER, Pessan JP, Monteiro DR
UNIVERSIDADE DO OESTE PAULISTA
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse

Este estudo preparou um nanocarreador de cloreto de cetilpiridínio (CCP) usando nanopartículas de óxido de ferro (NPsOF) e quitosana (QTS), e avaliou seu efeito antibiofilme sobre Candida albicans e Candida glabrata. NPsOF revestidas com QTS foram carregadas com CCP e o nanocarreador resultante, caracterizado por diferentes métodos físico-químicos. A concentração inibitória mínima (CIM) do nanocarreador foi determinada pelo método da microdiluição em caldo. Biofilmes simples e misto das espécies de Candida foram formados por 48 horas e tratados durante 24 horas com o nanocarreador contendo CCP nas concentrações de 15,6 (NPsOF-QTS-CCP15,6), 39 (NPsOF-QTS-CCP39) e 78 µg/mL (NPsOF-QTS-CCP78). O efeito antibiofilme foi avaliado através da quantificação de células cultiváveis, biomassa total e atividade metabólica. Os dados foram submetidos a ANOVA a um critério seguida do teste de Fisher LSD, com nível de significância de 5%. Os resultados de caracterização confirmaram a formação de um nanocarreador com tamanho menor que 327 nm. Para as duas cepas avaliadas, NPsOF-QTS-CCP e CCP mostraram os mesmos valores de CIM (0,78 µg/mL). NPsOF-QTS-CCP78 e CCP sozinho promoveram reduções significativas na biomassa total e atividade metabólica dos biofilmes simples e mistos, comparados aos controles. Contudo, NPsOF-QTS-CCP78 foi mais efetivo do que CCP na redução das células cultiváveis de todos os biofilmes avaliados.
Os achados deste estudo indicam que o nanocarreador NPsOF-QTS-CCP tem potencial para uso como agente terapêutico no controle de biofilmes fúngicos.
(Apoio: CNPq  N° 404721/2016-8  |  CAPES  N° Código 001)

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PN0017 - Painel Aspirante
Área: 3 - Cariologia / Tecido Mineralizado

Controle do desgaste dental erosivo com uma película híbrida experimental carregada com agentes anti-erosivos
Sakae LO, Bezerra SJC, Viana IEL, Aoki IV, Hara AT, Scaramucci T
Dentística - UNIVERSIDADE DE SÃO PAULO - SÃO PAULO
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse

O objetivo desse trabalho foi avaliar o efeito de uma película híbrida carregada com agentes anti-erosivos, encapsulados ou não, no controle do desgaste dental erosivo em esmalte e dentina. Espécimes de esmalte e dentina bovinos previamente erodidos (n=10/substrato) foram alocados nos seguintes grupos experimentais: 1. Controle negativo (C - água destilada); 2. Controle positivo (FP - Flúor Protector 1000 ppm F-); 3. Película híbrida (H); 4. H + NaF (4530 ppm F-); 5. H + NaF encapsulado (0,05g de nano cápsulas/ml); 6. H + NaF + SnCl2 (H+F+Sn - 4530 ppm F- + 6260 ppm Sn2+); 7. H + NaF + SnCl2 encapsulado (0,05g de cada nanocápsulas/ml). Os espécimes foram então submetidos a 5 dias de ciclagem erosiva-abrasiva. O desafio erosivo (ácido cítrico 0,3%, 5 min) foi realizado 4x/dia, seguido por exposição à saliva artificial (60 min). Trinta minutos após o primeiro e último desafios erosivos do dia, os espécimes foram escovados por 15 s em uma máquina de escovação, com uma suspensão de dentifrício fluoretado/água destilada, totalizando 2 min de exposição à suspensão. A perda de superfície (PS) dos espécimes (em µm) foi avaliada em um perfilômetro ótico, ao final da ciclagem. Os dados foram submetidos aos testes de Kruskal-Wallis e Dunn (α=0.05). Para ambos os substratos, nenhum grupo apresentou PS significativamente menor que o controle negativo (p>0,05).
Nenhum material foi eficaz no controle do desgaste dental erosivo em esmalte e dentina. O carregamento da película híbrida com agentes anti-erosivos não promoveu melhora no seu potencial protetor contra erosão-abrasão.
(Apoio: FAPs - Fapesp  N° 2017/14691-6  |  FAPs - Fapesp  N° 2017/13855-5)

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PN0019 - Painel Aspirante
Área: 3 - Controle de infecção / Microbiologia / Imunologia

Ácido cafeico contra Streptococcus mutans: efeito antimicrobiano e imunomodulador em macrófagos
Lamarque GCC, Sorgi CA, Nelson-Filho P, Faccioli LH, Paula-Silva FWG
Clínica Infantil - UNIVERSIDADE DE SÃO PAULO - RIBEIRÃO PRETO
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse

Streptococcus mutans são os micro-organismos cariogênicos alvo da maioria dos agentes antimicobrianos. Tendo em vista que esses agentes podem apresentar efeitos colaterais, há necessidade de buscar por materiais que sejam compatíveis com os tecidos. O objetivo deste estudo foi investigar os efeitos antimicrobiano e anti-inflamatório do ácido cafeico na resposta de macrófagos contra S. mutans. S. mutans (10⁸ CFU/ mL) foram incubados com ácido cafeico para determinar a concentração inibitória média (IC50) e macrófagos foram incubados com ácido cafeico para determinar a viabilidade e citotoxicidade em contato o produto. Os efeitos anti-inflamatórios foram mensurados pelo acúmulo de óxido nítrico, produção do fator de necrose tumoral-α (TNF-α) e da prostaglandina E₂ (PGE₂). A fosforilação de NF-kB e a sobrevivência de S. mutans em macrófagos infectados por S. mutans também foi investigada. Verificamos que o ácido cafeico apresentou atividade antimicrobiana contra S. mutans (IC50 = 2,938 ± 0,1225 mM), sem efeito citotóxico. O ácido cafeico apresentou atividade imunomoduladora, inibindo a produção de nitrito, TNF-α e PGE₂ possivelmente pela via NF-kB.
Esse estudo mostra que o ácido cafeico apresenta efeito antimicrobiano contra S. mutans e potencial anti-inflamatório e imunomodulador em macrófagos, indicando que novos estudos podem ser realizados para avaliar a sua eficácia in vivo e os efeitos do uso a longo prazo.
(Apoio: CNPq  N° 140186/2020-4)

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PN0020 - Painel Aspirante
Área: 3 - Cariologia / Tecido Mineralizado

Efeito da cistatina derivada da cana-de-açúcar na viabilidade do biofilme microcosmo para proteção contra cárie dentária
Araujo TT, Camiloti GD, Souza BM, Dionizio A, Carvalho TS, Magalhães AC, Henrique Silva F, Buzalaf MAR
Ciências Biológicas - UNIVERSIDADE DE SÃO PAULO - BAURU
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse

Este estudo avaliou o efeito da da cistatina derivada da cana-de-açúcar (CaneCPI-5) na viabilidade do biofilme de microcosmo e na prevenção da desmineralização do esmalte. O biofilme microcosmo foi formado in vitro sobre espécimes de esmalte bovino (4X4mm; n=45) a partir de um pool de saliva humana e saliva McBain nas primeiras 8h de cultivo. A partir das primeiras 8h, os espécimes foram expostos apenas à saliva McBain contendo sacarose a 0,2% e, uma vez ao dia, foram tratados com as soluções por 60 s, durante 5 dias consecutivos. As soluções avaliadas foram: PBS (controle negativo), clorexidina 0,12% (CHX; controle positivo) e 3 concentrações de CaneCPI-5 (0,05; 0,1 e 0,5 mg/mL). A viabilidade do biofilme foi determinada pelo método de resazurina e a desmineralização do esmalte foi quantificada por microrradiografia transversal. Os dados foram analisados por ANOVA/Tukey (p<0,05). Todas as soluções contendo CaneCPI-5 reduziram significativamente a viabilidade do biofilme em comparação ao PBS, com melhor efeito para a CaneCPI-5 0,5 mg/mL, que apresentou, entretanto, resultados inferiores à CHX. Todas as concentrações de CaneCPI-5 reduziram significativamente a perda mineral e a profundidade da lesão em relação ao PBS, sendo, entretanto, inferiores à CHX.
Portanto, a CaneCPI-5 foi capaz de reduzir a viabilidade do biofilme e o seu potencial cariogênico.
(Apoio: FAPESP  N° 2019/08032-5)

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PN0023 - Painel Aspirante
Área: 3 - Controle de infecção / Microbiologia / Imunologia

Avaliação microbiológica em biofilme multiespecie da hipericina-glucamina e ftalocianina-glucamina na terapia fotodinâmica
Sánchez-Puetate JC, Carvalho GG, Maquera-Huacho PM, Spolidorio DMP, Perussi JR, Ribeiro AO, Marcantonio RAC
Diagnostico e Cirurgia - UNIVERSIDADE ESTADUAL PAULISTA - ARARAQUARA
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse

O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos da terapia fotodinâmica antimicrobiana (aPDT), mediada por dois fotossensibilizadores (FS): Hipericina-glucamina (Hy-g) e Ftalocianina-glucamina (Ft-g) num modelo de biofilme multiespécie de Porphyromonas gingivalis (Pg), Aggregatibacter actynomicetemcomitans (Aa), Fusobacterium Nucleatum (Fn) e Streptococcus oralis (So). Foram obtidos biofilmes cultivados em placas que foram mantidas a 37^oC, em câmera de anaerobiose e o meio renovado a cada 24 horas. No grupo aPDT-Ft-g o biofilme foi irradiado com luz vermelha de 660 nm (39,65 J/cm²) (aPDT 1) e no grupo aPDT-Hy-g as placas foram irradiadas por luz âmbar de 590 nm (39,30 J/cm²) (aPDT 2). Os tratamentos foram conduzidos independentes e em triplicata (n=9). Após aplicação dos tratamentos, foi analisada a viabilidade dos micro-organismos com a técnica combinada de PCR em tempo real (qPCR) com o Propidium Monoazide (PMA). Os dados foram submetidos a análise estatística (p<0,05) obtendo diferenças estatisticamente significativas na viabilidade (redução entre 0,83 e 2,03 Geq/ml) para Pg, Fn e Aa com o grupo aPDT 1.
A aPDT mediada pelos fotossensibilizadores testados apresentou reduções estatisticamente significativas para o grupo aPDT 1, mesmo assim, ainda é limitada a ação destes contra micro-organismos anaeróbios em forma de biofilmes.
(Apoio: FAPESP  N° 2016/00275-8)

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PN0024 - Painel Aspirante
Área: 3 - Fisiologia / Bioquimica / Farmacologia

Análise do efeito dose resposta da administração cumulativa de montelucaste sobre marcadores ósseos plasmáticos em camundongos
Parra da Silva RB, Carmo-Ribeiro KHA, Biguetti CC, Chaves-Neto AH, Matsumoto MA
Cirurgia e Clínica Integrada - UNIVERSIDADE ESTADUAL PAULISTA - ARAÇATUBA
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse

Leucotrienos (LTs) possuem papel importante em processos inflamatórios crônicos (ex: asma), nos quais drogas antagonistas como o Montelucaste (MTK) são cronicamente utilizadas. Ainda, LTs também parecem exercer influência sobre o metabolismo ósseo, porém os efeitos do uso crônico de MTK sobre tal tecido são pouco entendidos. Neste estudo avaliaram-se o efeitos cumulativos e dose resposta de MTK sobre os níveis plasmáticos de marcadores ósseos (Cálcio, Fosfato, fosfatase alcalina e TRAP) em camundongos 129Sv machos adultos, divididos em grupos C (tratados com SF 0,9%), MTK2 (2mg/Kg), e MTK4 (4mg/Kg) por via oral uma vez ao dia, ao longo de 8, 15 e 22 dias (n=5 animais por grupo e período). Ao final, realizaram-se as eutanásias e coleta do plasma para análises quantitativas bioquímicas, com nível de significância em 5%. Os níveis de cálcio (mg/dL) foram maiores no grupo MTK4 comparado aos C e MTK2 aos 8 e 22 dias. Os valores do fosfato (mg/dL) apontaram aumento significativo no grupo C aos 22 dias em comparação ao dia 8. Entre os grupos, houve aumento no MTK4 em comparação ao MTK2 aos 8 dias, bem como aumento significativo comparando o MTK4 e grupos C e MTK2 aos 22 dias. A TRAP apresentou níveis (U/L) menores no grupo C em comparação com MTK2 aos 15 dias e com MTK4 aos 22 dias. Não foram detectadas diferenças para fosfatase alcalina.
Em conclusão, administração continua e em diferentes doses de MTK alteram os marcadores ósseos plásmaticos, indicando um potencial efeito anabólico da droga no metabolismo deste tecido.
(Apoio: FAPs - FAPEAM)

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PN0028 - Painel Aspirante
Área: 3 - Controle de infecção / Microbiologia / Imunologia

Epidemiologia da COVID-19 em crianças x Desinfecção de chupetas
Souza VGC, Apolonio ACM
UNIVERSIDADE FEDERAL DE JUIZ DE FORA
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse

Dada a repercussão da pandemia causada pelo novo coronavírus em 2019 - COVID-19 (SARS-CoV-2), a prevenção contra a disseminação do vírus é prioritária. Assim, buscou-se relacionar a epidemiologia da doença em crianças com a necessidade da desinfecção de chupetas, por meio de revisão da literatura. Pesquisa em diferentes bases de dados, dos últimos 4 meses (janeiro-abril 2020), utilizando-se as buscas "novel coronavirus and children" e "novel coronavirus and pacifier", recuperou 164 artigos, que após análise restaram 17 que se enquadraram nos critérios de inclusão. Contrariamente ao que se pensava no início do surto, crianças são susceptíveis à doença, mas a maioria (>90%) é assintomática ou tem manifestações clínicas leves. Sendo as ≤3 anos mais susceptíveis às formas severas da doença. O agravante é que nessa idade, as crianças comumente usam chupetas, que estão em contato com mucosa oral e saliva (principal meio de contágio do SARS-CoV-2), além de sofrerem quedas. Portanto, sua correta desinfecção é essencial em tempos de pandemia, apesar de não haver consenso sobre a melhor estratégia de realizá-la.
Considerando a epidemiologia da COVID-19 em crianças potencialmente usuárias de chupeta e a capacidade desta de transmissão do vírus, tanto para as crianças quanto para os cuidadores, a atenção na desinfecção das mesmas deve ser reforçada, visando evitar a propagação da doença.

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PN0029 - Painel Aspirante
Área: 3 - Fisiologia / Bioquimica / Farmacologia

Proteoma salivar: um papel potencial no diagnóstico precoce do câncer de mama
Fernandes LL, Sena I, Lorandi LL, Birbrair A, Heller D
Ppgo - UNIVERSIDADE CRUZEIRO DO SUL
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse

Este estudo propõe identificar biomarcadores para o diagnóstico precoce do câncer de mama através da análise do proteoma salivar de camundongos transgênicos C(3)1-TAg que desenvolvem câncer de mama semelhante ao que ocorre em humanos. Coletou-se a saliva de animais C(3)1-TAg de 4 e 8 semanas de idade e seus respectivos controles. Essa idade foi escolhida pelo fato do animal possuir a alteração genética que favorece o câncer de mama, porém na análise histopatológica mamária ainda não há a presença de alterações celulares. A salivação foi induzida por pilocarpina e obtida por micropipeta. A análise do proteoma salivar foi realizada por espectrometria de massa sem marcação. Interessantemente, em análises semiquantitativas do proteoma salivar detectou-se que animais C(3)1-TAg apresentaram maior expressão proteica das vias relacionadas à inflamação, angiogênese e hipóxia, mesmo sem apresentar alteração celular visível na histopatologia. Além disso, análises quantitativas mostraram que esses animais C(3)1-TAg tem uma expressão significativamente maior (p=1.6404, Teste T) de proteínas relacionadas ao catabolismo lipídico, um importante processo de produção de energia para a proliferação de células tumorais.
Dessa forma, nossos resultados mostram que análise proteica da saliva pode ser promissora para identificar alterações celulares presentes nas células tumorais que ainda não foram detectadas pelo método histopatológico clássico.

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PN0032 - Painel Aspirante
Área: 3 - Controle de infecção / Microbiologia / Imunologia

Citotoxicidade de extratos de diferentes espécies de Cryptocarya (Lauraceae)
Ribas BR, Zoccolotti JO, Tasso CO, Scabelo L, Jorge JH
Materiais Odontológicos e Prótese - UNIVERSIDADE ESTADUAL PAULISTA - ARARAQUARA
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse

O objetivo do estudo foi avaliar a citotoxicidade de extratos de espécies de Cryptocarya, sobre células epiteliais (NOK). Utilizando-se as Concentrações Inibitórias Mínimas (CIMs) para as células planctônicas e biofilme de C. albicans. Para análise da citotoxicidade, 105 células/mL, foram colocados em cada compartimento de uma placa de 96 orifícios, incubada em estufa com 5% de CO2, a 37ºC por 24 horas. Posteriormente, o meio de cultura foi desprezado, permanecendo as células aderidas no fundo da placa. Foram adicionados 100 µL de meio de cultura novo contendo a solução da planta medicinal, em diferentes concentrações, e 10 µL de solução de AlamarBlue®. A fluorescência dos extratos (n=12) foi medida usando Fluoroskan Ascent (560 nm e 590 nm) após 6, 12 e 24 horas. Os resultados foram submetidos aos testes ANOVA mista e Tukey (α=0,05). Os resultados mostraram que houve diferença estatística significativa entre os grupos, em todos os tempos (p˂0,05) e que todos os extratos diminuíram a viabilidade celular em comparação com o grupo controle. Quando os resultados foram convertidos em porcentagem e comparados com o grupo controle, verificou-se que os extratos, na CIM para biofilme, foram considerados intensamente citotóxico, em todos os tempos. Nas CIMs para as células planctônicas, os extratos variaram de não citotóxicos a intensamente citotóxico. Para todos os grupos, a porcentagem de células viáveis diminuiu com o tempo.
Assim, podemos concluir que os extratos obtidos das folhas e frutos de C. Moschata e C. Mandioccana reduziram a viabilidade das células epiteliais.
(Apoio: PIBIC/REITORIA  N° 46203)

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PN0033 - Painel Aspirante
Área: 3 - Cariologia / Tecido Mineralizado

Verniz fluoretado contendo trimetafosfato de sódio nanoparticulado reduz a desmineralização do esmalte dental in vitro
Báez-Quintero LC, Delbem ACB, Alves KDB, Paiva MF, Silva IF, Cunha RF, Pessan JP
Odontología Preventiva e Restauradora - UNIVERSIDADE ESTADUAL PAULISTA - ARAÇATUBA
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse

Avaliou-se o efeito de vernizes fluoretados (F) suplementados com nanopartículas de Trimetafosfato de Sódio (TMP) sobre a desmineralização do esmalte dental in vitro. Blocos de esmalte dental bovino (n=48) foram selecionados por meio de Dureza de Superfície (DS) e aleatoriamente divididos em 4 grupos experimentais (n=12/grupo): Placebo (sem F ou TMP), 5% NaF, 5% NaF/5% TMP microparticulado e 5% NaF/5% TMP nanoparticulado. Os blocos receberam uma única aplicação dos vernizes e foram imersos em solução remineralizadora (RE) por 6 h. Após a remoção dos vernizes, os blocos foram transferidos para uma solução desmineralizadora (DES) por 6 h e em seguida para uma solução RE por 18 h. Este ciclo foi repetido por 5 dias, seguido de imersão em uma solução RE nova por 2 dias adicionais. Após dos tratamentos, realizou-se análise de DS final e análise de dureza em secção longitudinal (ΔKHN). Os dados foram submetidos a ANOVA a 1 critério, seguida do teste de Student-Newman-Keuls (p<0,05). A menor perda de DS foi observada para o grupo contendo TMP nanoparticulado (-22,5%), seguido do TMP microparticulado (-28,3%), 5% NaF (-44,0%) e Placebo (-66,2%), com diferenças significativas entre os grupos (p<0,05). Quanto a ΔKHN o mesmo padrão foi observado, sendo o menor valor para o grupo com TMP nanoparticulado (1821,9) e o maior para o Placebo (4084,4), com diferenças estatisticamente significativas entre todos grupos (p<0,05).
Conclui-se que a adição de nanopartículas de TMP a um verniz F convencional reduz significativamente a desmineralização do esmalte dental bovino in vitro.
(Apoio: FAPs - FAPESP  N° 2018/25860-6  |  CAPES  N° 88887.374376/2019-00)

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