PN0038 - Painel Aspirante
Área: 3 - Controle de infecção / Microbiologia / Imunologia

Avaliação do efeito fototóxico de diferentes comprimentos de onda de luz LED sobre a expressão gênica de Candida albicans
Sousa TV, Carmello JC, Jordão CC, Dias LM, Pavarina AC
Reabitação Oral - UNIVERSIDADE ESTADUAL PAULISTA - ARARAQUARA
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse

Candida albicans é a espécie mais associada a formas disseminadas de infecção (candidemia) resultando em altos índices de morbidade e mortalidade. O mecanismo de ação da fototerapia baseia-se na produção de espécies reativas de oxigênio, podendo causar danos oxidativos no DNA, o que contribui para a instabilidade genética e possível mutação. Anteriormente, foi observado que a aplicação de LED azul causou danos no DNA de C. albicans. A enzima topoisomerase II (topo II) é essencial para replicação, transcrição, recombinação e condensação cromossômica do DNA, além de reparar possíveis danos causados no DNA. Dessa forma, o presente estudo avaliou a ação da fototerapia mediada por LED nos diferentes comprimentos de onda e doses de luz sobre a expressão gênica da topo II em C. albicans. Suspensões padronizadas de C. albicans foram submetidas aos tratamentos com luz LED: para o LED azul (455 nm): 15 e 50 J/cm ² ; vermelho (660 nm): 5 e 50 J/cm ² ; amarelo (590 nm): 0,1 e 10 J/cm ² e branco (multicromático): 300 lux e 500 lux. Então foi realizada a extração e purificação de RNA, conversão para cDNA e qPCR. Os dados obtidos foram submetidos a ANOVA a um critério fixo, seguido pelo pós-teste de Tukey (p≤0.05) e foram comparados com as células sem tratamento. Os resultados demonstraram que as duas doses de luz azul e luz vermelha diminuíram a expressão de topo II (p≤0.0001). As luzes amarela e branca, promoveram aumento significativo na expressão da enzima.
Podemos concluir que a expressão da enzima Topoisomerase II em C. albicans depende comprimentos de onda da luz LED utilizado para o tratamento.
(Apoio: CNPq  N° 47721  |  FAPESP  N° 2017/02559-6   |  FAPESP  N° 2016/13868-7)

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PN0039 - Painel Aspirante
Área: 3 - Fisiologia / Bioquimica / Farmacologia

Ação do hipoclorito de sódio 2,5% e da clorexidina 0,12% e 2% sobre a cândida albicans de origem bucal
Bione FTSC, Camelo RS, Melo GTM, Paz ESL, Souza GFM
Pós Graduação - UNIVERSIDADE ESTADUAL PAULISTA - ARARAQUARA
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse

Avaliar a atividade antifúngica do hipoclorito de sódio 2,5%, da clorexidina 0,12% e 2% sobre a Candida albicans bucal. Amostras de voluntários com estomatite protética foram coletadas e transportadas em solução de cloranfenicol 25mg/L. Obteve-se 8 amostras, que foram semeadas em meio Ágar Sabouraud Dextrose (SBD) com cloranfenicol (50mg/L) e incubadas à 28 ± 2°C / 48h. Das que cresceram foram retiradas alíquotas e semeadas em meio CHROMagar Candida e incubadas a 37ºC / 48h para identificação das espécies. Após, alíquotas de C. albicans foram semeadas em meio SBD e depositados discos de papel com clorexidina 2% e 0,12% e hipoclorito Marcas Dragão e Brilux e incubadas por 48h à temperatura ambiente. Seguiu-se a leitura dos halos de inibição em triplicata. Constatou-se crescimento em 87,5% das amostras, sendo verificada a C. albicans em todas. Os quatro produtos testados exibiram atividade antimicrobiana, porém os halos de inibição do hipoclorito 2,5% foram, em média, maiores que os da Clorexidina 0,12% e Clorexidina 2%.
Os produtos testados podem ser utilizados como coadjuvantes no tratamento e controle tópicos da estomatite protética. A Clorexidina 0,12% e Clorexidina 2% podem ser utilizadas para bochecho e o Hipoclorito de sódio 2,5% para higienização das próteses.
(Apoio: CNPq)

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PN0040 - Painel Aspirante
Área: 3 - Cariologia / Tecido Mineralizado

A progressão da lesão de cárie aumenta a atividade da superóxido dismutase e biodisponibilidade de óxido nítrico salivar
Lisboa ACG, Araujo HC, Chaves-Neto AH, Nakamune ACMS, Garcia WG, Oliveira SHP, Pessan JP, Silva CA
Odontologia Preventiva e Restauradora - UNIVERSIDADE ESTADUAL PAULISTA - ARAÇATUBA
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse

O objetivo do presente estudo foi avaliar alterações no dano oxidativo, atividade de enzimas antioxidantes e biodisponibilidade do óxido nítrico (NO) salivar em diferentes estágios da cárie. Crianças (1 a 3 anos) de uma creche municipal de Birigui, SP, foram avaliadas e classificadas segundo ICCMS^TM em 4 grupos (n=30/grupo), grupo A (livres de cárie), grupo B (cárie inicial), grupo C (cárie moderada) e grupo D (cárie extensa). A saliva foi coletada após 2 horas de jejum, com uso de Salivete®. Na saliva, foi avaliado o dano oxidativo (DO) pela concentração de proteína carbonilada (PC), usando o método alcalino de DNPH (2,4-Dinitrofenilhidrazina), a atividade enzimática da superóxido dismutase sensível e insensível ao cianeto de potássio (SOD sens KCN e SOD ins KCN, respectivamente) pelo método da auto oxidação do pirogalol, e concentrações de nitrito (metabólito de NO) pelo método de Griess. Os resultados foram comparados entre os grupos (ANOVA, pós teste de Student-Newman-Keuls, p< 0,05). A correlação entre os grupos e as variáveis foram avaliadas por correlação de Spearman. A atividade da SOD sens KCN e a biodisponibilidade do NO foram maiores na saliva de crianças dos grupos C e D e uma redução gradativa nos níveis de PC salivar foi observada nos grupos C e D. Correlação significativa foi observada entre as variáveis e os diferentes grupos (r = -0,7458 para PC, r = 0,6028 para SOD, r = 0,8267 para NO).
Em conclusão, nossos resultados sugerem que a progressão de lesões de cárie aumenta a atividade da SOD sens KCN na saliva, a qual reduz o DO e aumenta a biodisponibilidade do NO salivar.
(Apoio: CAPES  N° Código 001)

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PN0041 - Painel Aspirante
Área: 3 - Fisiologia / Bioquimica / Farmacologia

Alterações no perfil proteômico da película adquirida do esmalte após bochecho com peptídeo derivado da estaterina
Taira EA, Carvalho G, Ferrari CR, Martini T, Dionizio A, Ventura TMO, Araujo TT, Buzalaf MAR
Estomatologia e Biologia Oral - UNIVERSIDADE DE SÃO PAULO - BAURU
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse

Avaliou-se o perfil proteômico da película adquirida do esmalte (PAE) formada por 3 min ou 2 h após bochecho com peptídeo derivado da estaterina contendo 15 aminoácidos (região aminoterminal), com serinas 2 e 3 fosforiladas (Stat). Nove voluntários participaram em 2 dias consecutivos, nos quais, após profilaxia, bochecharam por 1 min 10 mL de tampão fosfato contendo Stat (1,88x10-5 M) ou tampão fosfato apenas (controle). A PAE foi formada sobre o esmalte por 3 min ou 2 h e coletada com papel filtro umedecido em ácido cítrico 3%. Após extração proteica, procedeu-se à análise proteômica quantitativa livre de marcadores. Em 3 min, 19 e 131 proteínas foram identificadas unicamente nos grupos tratado com Stat e controle, respectivamente, sendo proteínas típicas da PAE apenas encontradas no último. Apenas 2 proteínas (neutrófilo defensinas) foram aumentadas mediante tratamento com Stat, enquanto 65 foram diminuídas (várias típicas da PAE). Após 2 h, 50 e 109 proteínas foram identificadas exclusivamente nos tratamentos Stat e controle, respectivamente. Subunidades de hemoglobina e queratina foram apenas encontradas no grupo Stat, enquanto que cistatina C, catepsinas D e G, isoformas de heat shock 70 e protocaderina foram exclusivas do controle. 22 proteínas tiveram aumento de expressão com Stat, como histatina 1, albumina sérica e isoformas de neutrófilo defensinas e queratina. Entretanto, 77 proteínas foram diminuídas, a maioria típicas da PAE.
Em ambos os períodos avaliados, o tratamento com Stat alterou profundamente o perfil proteômico da PAE.
(Apoio: CAPES)

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PN0042 - Painel Aspirante
Área: 3 - Cariologia / Tecido Mineralizado

Fluoreto solúvel em HCl 0,01 N como indicador da biodisponibilidade sistêmica de fluoreto de dentifrícios à base de Na₂FPO₃/CaCO₃
Rocha-Gaspar DRC, Ricomini-Filho AP, Cury JA
Odontologia - FACULDADE DE ODONTOLOGIA DE PIRACICABA
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse

Nós hipotetizamos que o fluoreto solúvel (FST=FPO₃^2-+F^-) em HCl 0,01 N, e não o FT (FT=FST+F_ins), de dentifrício à base de Na₂FPO₃/CaCO₃ seria um indicador da biodisponibilidade sistêmica ao fluoreto (F). Foi conduzido um estudo in vivo, cruzado em 4 fases, nas quais 10 voluntários foram submetidos sequencialmente a quatro grupos de tratamento com o dentifrício Sorriso Dentes Brancos® (Na₂FPO₃/CaCO₃ 1450 μg F de FT/g) fresco e envelhecido. Grupo I-Dentifrício fresco (1332,5 μg FST/g), grupo II ao IV: dentifrício envelhecido tendo 1113,5; 796,6 e 684,3 μg de FST/g, respectivamente. Antes e por 180 min após a ingestão, amostras de sangue e saliva foram coletadas para determinação da concentração de F. Urina de 24 h do dia anterior (baseline) e do dia do experimento também foram coletadas para análise de F excretado. A concentração de F no plasma, saliva e urina foi determinada com EIE para F. A concentração de FT e FST dos dentifrícios foi determinada pelo protocolo de Cury et al. com as amostras preparadas em HCl 0,01 N e água. A área sob a curva da concentração de F no plasma e na saliva vs o tempo (ASC=ngF/mlxmin) e a concentração máxima de F no plasma (C_Max) foram calculadas. A quantidade de F excretada (mg F) foi calculada por subtração. Os dados foram analisados por correlação (p<0.05). Foi encontrada uma correlação significativa entre o FST ingerido e a ASC de F no plasma, C_Max, ASC de F na saliva e F excretado (r=0,68 p<0,0001; r=0,72 p<0,0001; r=0,47 p=0,0185; r=0,62 p<0,0001, respectivamente), mas não para o FT ingerido (p>0,05).
Os resultados dão sustentação à hipótese formulada.
(Apoio: CNPq  N° 435955/2018-7  |  CAPES  N° 001)

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PN0043 - Painel Aspirante
Área: 3 - Cariologia / Tecido Mineralizado

Dentifrícios fluoretados comercializados para crianças no Brasil e México
Leite-Filho AM, Valdivia-Tapia AC, Costa RCNP, Miranda LFB, Espinoza EV, Cury JA
UNIVERSIDADE DE SÃO PAULO - RIBEIRÃO PRETO
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse

Dentifrícios encontrados no México são produzidos por multinacionais, mas, no Brasil também são por fabricantes locais. O objetivo foi comparar a composição (sal fluoretado / abrasivo) de dentifrícios infantis comercializados no Brasil e no México, e avaliar a concentração (ppm F; mg F / kg) do fluoreto potencialmente biodisponível para possuir benefício anticárie (fluoreto solúvel total, FST). Vinte e quatro marcas foram encontradas no Brasil, e de acordo com o fabricante: 19 formuladas com NaF / SiO₂ (16 com 1100, uma com 1000, uma com 995 e outra com 500 ppm F); 3 com Na₂FPO₃ / CaCO₃ (900, 1100 e 1179 ppm F) e duas com Na₂FPO₃ / SiO₂ (um com 1000 e outro com 1100 ppm F). No México, foram encontradas seis marcas, todas formuladas com NaF / SiO₂ (uma com 995, uma com 1085, três com 1100 e uma com 1450 ppm F). De cada marca foram adquiridos 2-3 tubos, analisados em duplicata seguindo protocolo validado (Cury et al., 2010). O fluoreto foi determinado com eletrodo íon específico por técnica direta, e os resultados expressos em ppm F (mg F / kg). As concentrações de fluoreto total (FT) foram próximas às declaradas pelos fabricantes do Brasil e México. O FST, foi próximo ao FT em dentifrícios com SiO₂ como abrasivo, vendidos em ambos países. Dentifrícios com CaCO₃ como abrasivo foram encontrados apenas no Brasil, e cerca de 21% do fluoreto total destas formulações apresentava-se insolúvel.
Conclui-se que dentifrícios infantis vendidos no Brasil e no México são diferentes, em termos de marcas, composição ou concentração de fluoreto e biodisponibilidade (FST) para eficácia no controle de cárie.
(Apoio: CAPES  N° 88887.341996-00  |  CAPES  N° 88882.445799/2019-01  |  CNPq  N° 131732/2019-6)

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PN0044 - Painel Aspirante
Área: 3 - Controle de infecção / Microbiologia / Imunologia

Terpineol induz menor metabolismo celular de biofilmes de Candida albicans e Streptococcus mutans
Martorano-Fernandes L, Lacerda MC, Borges-Grisi MHS, Almeida LFD
Faculdade de Odontologia de Piracicaba - FACULDADE DE ODONTOLOGIA DE PIRACICABA
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse

Avaliou-se o metabolismo celular de biofilmes uni-espécie de Candida albicans e Streptococcus mutans, e biofilmes duo-espécie expostos ao fitoconstituinte alfa-terpineol. Foram desenvolvidos biofilmes nas concentrações celulares de 1x10⁶ UFC/mL para C. albicans (ATCC 90028) e 1x10⁸ UFC/mL para S. mutans (UA 159) (37ºC em microaerofilia). Uma solução de alfa-terpineol foi utilizada nas concentrações de 80 mg/ mL (Terp 80) e 60 mg/ mL (Terp 60). Clorexidina 1% (CHX) e NaCl 0,9% foram utilizados como controles negativo e positivo, respectivamente. O tratamento foi realizado 24, 72 e 96 horas após a adesão celular e amostras dos biofilmes foram coletadas para análise 24h após a exposição às substâncias. Avaliou-se o metabolismo celular dos biofilmes por meio do ensaio de MTT (n=8/grupo). Os dados foram analisados por Mann Whitney (α = 5%). Quando expostos a Terp 80, Terp 60 e CHX, o metabolismo celular de biofilmes uni-espécie de S. mutans foi menor ao de biofilmes uni-espécie de C. abicans e duo-espécie em todos os tempos de avaliação (p < 0,05). Biofilmes que foram desenvolvidos por 24h e tratados com Terp 80, Terp 60 e CHX obtiveram menor metabolismo celular quando comparado ao controle positivo (p < 0,05). Similarmente, biofilmes de 72h e 96h expostos as duas concentrações de alfa-terpineol também obtiveram menor metabolismo celular em relação ao NaCl 0,9% (p < 0,05), entretanto, não diferiram da CHX.
As soluções de alfa-terpineol nas concentrações de 80 mg/ mL e 60 mg/ mL diminuíram o metabolismo celular de biofilmes uni-espécie e duo-espécie de C. albicans e S. mutans.
(Apoio: CAPES  N° 001)

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PN0045 - Painel Aspirante
Área: 3 - Cariologia / Tecido Mineralizado

Efeito do pH na reatividade do fluoreto com esmalte e dentina hígidos e desmineralizados
Ferreira RS, Valdivia-Tapia AC, Soares-Yoshikawa AL, Leite-Filho AM, Tabchoury CPM, Cury JA
Biociências - FACULDADE DE ODONTOLOGIA DE PIRACICABA
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse

Fluoreto total (FT) formado no esmalte/dentina pode ser usado como indicador do potencial anticárie da aplicação profissional de F (ATF) ao invés de CaF₂, mas isso não foi explorado. Assim, FT, CaF₂ e FAp formados em blocos de esmalte (E) e dentina (D) bovinos, hígidos (H) e desmineralizados (C) foram avaliados. Blocos de EH, EC, DH e DC (n=16/grupo) foram randomizados para soluções fluoretadas neutra ou acidulada (FFA) com 10000 μg F/mL. Blocos foram divididos ao meio; 16 hemiblocos submetidos aos tratamentos, por 4 min, e outros 16 como controle. FT foi determinado em 8 hemiblocos controle e 8 tratados, e CaF₂ e FAp nos outros 8 hemiblocos. Para determinação do FT, os hemiblocos foram submetidos a 6 extrações consecutivas em HCl 0,5 M e subsequente adição de TISAB II com NaOH. Os hemiblocos foram imersos em KOH 1 M por 24 h para extração de CaF₂, seguido de adição de TISAB II em HCl 1 M. Em seguida, FAp foi extraída como descrito para FT. F formado foi determinado em eletrodo íon-específico. Os resultados encontrados para os hemiblocos controle foram subtraídos dos tratamentos e expressos em µg F/cm² (CaF₂) e µg F/cm³ (FT e FAp). Dados foram analisados por ANOVA 2 fatores e teste de Tukey (α=5%). F reagiu até 30 μm da superfície dos substratos. Maiores valores de FT, CaF₂ e FAp foram observados na DC tratada com FFA (0,71±0,34, 493,5±318,9 e 0,10±0,06; p<0,05). Correlação linear positiva foi observada entre FT e CaF₂ apenas para DH (r=0,711, p=0,002) e DC (r=0,815, p<0,01).
Concluiu-se que análise de FT é capaz de diferenciar tanto profundidade da reação como reatividade de produtos para ATF.
(Apoio: CNPq  N° 141407/2018-2  |  CAPES  N° 001)

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PN0046 - Painel Aspirante
Área: 3 - Fisiologia / Bioquimica / Farmacologia

Metaboloma salivar e diabetes melito: dados de repositório público como oportunidade de estudar biomarcadores
Bem JSP, Paiva NF, Gardinassi LG, Faccioli LH, Aires CP
Clínica Infantil - UNIVERSIDADE DE SÃO PAULO - RIBEIRÃO PRETO
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse

Dados de pesquisa provenientes de repositórios públicos, como o Metabolomics Workbench (MW), apresentam uma infinidade de possibilidades de análise que, quando bem organizadas, podem subsidiar novos estudos, expandindo o conhecimento científico. Considerando que doenças sistêmicas podem gerar uma descarga de metabólitos e esta pode ser refletida na saliva, o objetivo deste trabalho foi coletar dados metabolômicos salivares disponíveis na plataforma MW e avaliar sua relação com Diabetes Melito (DM). Dados de espectrometria de massas e cromatografia líquida do metaboloma salivar de 40 pacientes foram coletados da plataforma MW e organizados em 4 grupos, conforme o tipo de DM (tipo 1 e tipo 2): DM1 com glicemia controlada; DM2 com glicemia não controlada; DM1 com glicemia controlada e DM2 com glicemia não controlada. Após análise de 6218 dados por linguagem computacional R, as vias metabólicas foram identificadas pelo programa de análise funcional Mummichog©. Os metabólitos ácido metilimidazolacético, paraxantina, metilxantina, prolina e esfingosina apresentaram concentrações estatisticamente diferentes entre os grupos, com destaque para esfingosina marcante em pacientes DM2 controlados. Esta é precursora de esfingolipídeos associados à resistência à insulina, estado pró-inflamatório diabético e indução da morte celular.
Os resultados sugerem que o estudo de dados de repositório público pode revelar associação entre saliva e diabetes trazendo, no futuro, grande contribuição científica ao estudo de biomarcadores desta importante doença.
(Apoio: PIBIC-USP)

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PN0048 - Painel Aspirante
Área: 4 - Ortodontia

Correlações entre anb, wits e perfil facial de tecidos moles em uma amostra de população
Salgado L, Santiago RC, Campos MJS, Vitral RWF, Sant´Anna EF
Ortodontia - UNIVERSIDADE FEDERAL DE JUIZ DE FORA
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse

O objetivo foi avaliar as correlações entre as relações esqueléticas sagitais estabelecidas por meio do ângulo ANB e Wits e avaliar o perfil facial dos tecidos moles (STFP), pelo ângulo G-Sn-Pog '. A amostra foi composta por 300 indivíduos (129 H e 171 M). As relações esqueléticas sagitais ântero-posteriores obtidas a partir do ângulo ANB, Wits e G-Sn-Pog foram obtidas por cefalogramas. As relações mandíbula-base (ANB e Wits) e o perfil facial foram categorizados em 3 grupos. Foram avaliados os coeficientes de correlação entre ângulo ANB/ Wits e entre STFP/ padrão esquelético. Observou-se correlação estatisticamente significante (p <0,001) entre o ângulo ANB e Wits (r = 0,738), entre G-Sn-Pog' e ANB (r = -.708) e entre G-Sn-Pog" e Wits (r = -.586). Quando avaliados separadamente de acordo com diferentes grupos de perfis faciais de tecidos moles, houve uma fraca correlação entre ANB e Wits nos indivíduos com baixo ângulo de STFP (II) e uma correlação moderada nos indivíduos com alto ângulo de STFP (III). A correlação entreANB e Wits foi de moderada a alta, exceto nos indivíduos com perfil facial de partes moles do Grupo II, onde não foi observada tendência consistente entre as avaliações de ANB e Wits.
A correlação entreANB e Wits foi de moderada a alta, exceto nos indivíduos com perfil facial de partes moles do Grupo II, onde não foi observada tendência consistente entre as avaliações de ANB e Wits.

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