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PN1245 - Painel Aspirante
Área: 3 - Controle de infecção / Microbiologia / Imunologia
Apresentação: 10/09 - Horário: 13h00 às 17h30 - Sala: Área dos Painéis
Influência dos fatores solúveis de biofilmes de Candida albicans e Streptococcus mutans em células epiteliais normais e tumorais
Oliveira JS, Ribas BR, Tasso CO, Ferro AC, Jorge JH
Materiais Odontológicos e Prótese UNIVERSIDADE ESTADUAL PAULISTA - ARARAQUARA
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse
O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito dos fatores solúveis (FS) de biofilmes simples e misto de Candida albicans e Streptococcus mutans sobre células de carcinoma espinocelular (SCC 25) e células epiteliais orais normais (NOK-SI). Biofilmes simples e misto de C. albicans e S. mutans foram cultivados e avaliados quanto ao número de colônias viáveis (UFC/mL). Os fatores solúveis foram separados dos biofilmes com filtro de acetato de celulose isento de surfactante de baixa ligação proteica de 0,20 µm. Posteriormente, os FS foram aplicados em culturas de NOK-SI e SCC 25 em monocamada. O metabolismo celular foi avaliado por meio do teste AlamarBlue®. Todos os experimentos foram realizados em triplicata, em três ocasiões independentes (n=9). Realizou-se análise descritiva dos dados e após checagem da normalidade e da homoscedasticidade, foi feito o teste ANOVA (α= 0,05). Os resultados mostraram que houve maior número de UFC/mL de S. mutans em biofilme simples e misto em comparação ao número de UFC/mL de C. albicans em ambas as condições (simples e misto) de crescimento. O estímulo com os fatores solúveis de biofilmes reduziu significativamente o metabolismo de ambas as células.
Concluiu-se que os fatores solúveis derivados de biofilmes simples de C. albicans, S. mutans e misto, de ambas as espécies, causaram uma diminuição significativa no metabolismo das células SCC 25 e NOK-SI, principalmente após 24 horas.
(Apoio: PIBIC Reitoria/UNESP N° 2721)
PN1246 - Painel Aspirante
Área: 3 - Cariologia / Tecido Mineralizado
Apresentação: 10/09 - Horário: 13h00 às 17h30 - Sala: Área dos Painéis
Atividade tampão de hexametafosfato de sódio micro- ou nano-particulado e efeito na produção de ácido lático por biofilmes microcosmos
Sampaio C, Deng DM, Exterkate R, Zen I, Hosida TY, Monteiro DR, Delbem ACB, Pessan JP
Odontologia Preventiva e Restauradora UNIVERSIDADE ESTADUAL PAULISTA - ARAÇATUBA
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse
Esse estudo avaliou a atividade tampão de micropartículas (HMPmicro) ou nanopartículas (HMPnano) de hexametafosfato de sódio, e seus efeitos sobre a produção de ácido lático por biofilmes microcosmos derivados de saliva. Biofilmes foram formados sobre espécimes de vidro por 24 h. Desse momento em diante, soluções contendo 0,2% de HMPmicro ou HMPnano, combinadas ou não ao fluoreto (F; 220 ppm), estavam constantemente presentes no meio de cultura (McBain). 220 ppm F (220F) foi testado como controle positivo, e meio de cultura sem adição de ativos foi testado como controle negativo (CTL). Os meios foram renovados duas vezes ao dia e seu pH, avaliado por meio de eletrodo de pH. A produção de ácido lático foi analisada espectrofotometricamente, enquanto a capacidade tampão dos meios de cultura com os ativos foi determinada com eletrodo de pH, após adição consecutiva de HCl 3,2%. Os dados foram submetidos a ANOVA ou teste de Kruskal Wallis, seguidos pelo teste de Student-Newman-Keuls (p<0.05). HMPmicro ou HMPnano levaram a reduções significativas na produção de ácido lático e no pH dos meios de culturas dos biofilmes quando comparados aos controles. Além disso, HMPmicro e HMPnano foram capazes de sustentar pH mais elevados mediante a adição de ácido se comparado aos controles positivo e negativo. Os efeitos do HMP sobre todos os parâmetros avaliados foram observados independentemente do tamanho da partícula ou presença de F.
Conclui-se que o HMP demonstrou capacidade tampão significativa, além de reduzir a produção de ácido lático por biofilmes microcosmos derivados de saliva.
(Apoio: CAPES N° 001 | CAPES N° 88887.371644/2019-00)
PN1249 - Painel Aspirante
Área: 3 - Controle de infecção / Microbiologia / Imunologia
Apresentação: 10/09 - Horário: 13h00 às 17h30 - Sala: Área dos Painéis
Influência do peptídeo antimicrobiano Hylin-a1 sobre culturas de Candida albicans e células humanas
Dias LM, Medeiros KS, Silva IM, Cilli EM, Pavarina AC
UNIVERSIDADE ESTADUAL PAULISTA - ARARAQUARA
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse
As infecções fúngicas invasivas (IFIs) possuem alta taxa de mortalidade em humanos com prevalência superior a 50% em pacientes imunodeprimidos. O uso de peptídeos antimicrobianos (PAMs) pode ser considerado uma terapia alternativa no controle da infecção, principalmente por ser de aplicação local e apresentar atuação em múltiplos alvos celulares. O objetivo desse trabalho foi avaliar a influência do PAM Hylin-a1 sobre suspensões de Candida albicans (ATCC 90028) e células humanas. A sintetização e purificação do peptídeo foi realizada com pureza >95%. Cepas de C. albicans foram crescidas em meio Yeast Nitrogen Base (YNB) na concentração de 106 UFC/mL. Concentrações de Hylin-a1 variando de 2 a 1024 μg/mL foram utilizadas para determinação da Curva de sobrevivência. As células NOK-si (queratinócitos orais) e FGH (fibroblastos gengivais) foram cultivadas em meio de Eagle modificado por Dulbecco (DMEM) e utilizadas na quantidade 106 (NOK-si) e 105 células/poço (FGH) para realização do teste de Citotoxicidade da Hylin-a1 através do AlamarBlue. O nível de significância adotado foi de 5% (n=12). Após a análise do teste antimicrobiano, foi observado uma diminuição de + 3 log10 a partir da concentração 256 μg/mL. A concentração inibitória mínima foi de 128 μg/mL. Quanto ao teste de AlamarBlue, as concentrações testadas de Hylin-a1 foram severamente citotóxicas (>75%) frente ambas as células.
O peptídeo Hylin-a1 possui atividade antimicrobiana frente culturas de C. albicans, no entanto, foi severamente citotóxico às células NOK-si e FGH.
(Apoio: FAPs - FAPESP N° 2020/16227-8)
PN1251 - Painel Aspirante
Área: 3 - Cariologia / Tecido Mineralizado
Apresentação: 10/09 - Horário: 13h00 às 17h30 - Sala: Área dos Painéis
Avaliação da desmineralização superficial do esmalte tratado com flúor e laser utilizando Microscopia Eletrônica de Varredura
Caramel-Juvino A, Fontes-Oliveira YR, Avelino SG, Zezell DM
Centro de Lasers e Aplicações USP UNIVERSIDADE DE SÃO PAULO
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse
Avaliar o efeito da aplicação tópica de flúor (12.300 μF-/g) associada a irradiação com laser de Nd:YAG (84 J/cm2) na desmineralização superficial do esmalte, utilizando imagens de Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV). Utilizou-se 60 amostras de esmalte humano (CAAE: 02854118.3.0000.0075), divididas em 4 grupos: Controle Negativo, Flúor, Laser e Flúor + Laser (n=15). Após os tratamentos, os grupos foram subdivididos em 3 (n=5), para ciclagem de pH in vitro simulando três condições diferentes: pH 5 (abaixo do pH crítico do esmalte), pH 4,5 (abaixo do pH crítico do esmalte na presença do flúor) e pH 4 (investigativo). Quatro imagens por amostras foram obtidas por MEV a 15 kV, em aumento de 4.000X. As imagens foram classificadas como esmalte hígido, desmineralização leve, moderada ou severa. Para análise estatística, realizou-se uma normalização, onde a classificação de desmineralização severa foi equiparada a 100% de desmineralização, 0 foi equiparado à classificação saudável e as demais classificações foram proporcionais. Em pH 5, os grupos Flúor, Laser e Flúor + Laser não tiveram diferenças significativas entre si (p>0,05). Em pH 4,5, o grupo Flúor + Laser teve o menor percentual de desmineralização (p<0,05). Já em pH 4, não houve diferença significativa entre nenhum grupo.
Os dados sugerem que o tratamento de Flúor + Laser tem ação preventiva mesmo em pH abaixo do crítico para esmalte na presença do flúor (pH 4,5). Além disso, indica que possivelmente este tratamento altera o pH crítico da estrutura para valores entre 4,5 e 4, ampliando o poder preventivo do flúor.
(Apoio: CNPq N° INCT-465763/2014-6 | FAPs - FAPESP N° PDIP 17/50332-0 | Sisfoton MCTI/CNPq N° 440228/2021-2)
PN1252 - Painel Aspirante
Área: 3 - Fisiologia / Bioquimica / Farmacologia
Apresentação: 10/09 - Horário: 13h00 às 17h30 - Sala: Área dos Painéis
Gênomica funcional: engenharia reversa por meio de métodos de alta-performance na saliva de pacientes com síndrome de Sjögren
Florezi GP, Labate MTV, Labate CA, Barone FP, Mattos MR, Lourenço SV
Estomatologia UNIVERSIDADE DE SÃO PAULO - SÃO PAULO
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse
A síndrome de Sjögren (SS) é uma doença inflamatória autoimune que afeta glândulas salivares e lacrimais de difícil diagnóstico, já que ainda não existem biomarcadores com evidência científica que o permitam com acurácia. O objetivo deste trabalho foi comparar o perfil metabólico e proteico das amostras de saliva de 19 pacientes do sexo feminino, diagnosticadas com SS primária de acordo com os critérios estabelecidos pelo consenso Americano-Europeu, e 20 voluntárias saudáveis. Os metabólitos foram analisados por meio de cromatografia gasosa acoplada à espectrometria de massas (GC-TOF/MS (Pegasus HT, LECO). E as proteínas por meio do sistema cromatográfico nanoElute nanoflow, acoplado online, a um espectrômetro de massas hybrid trapped ion mobility spectrometry-quadrupole time-of-flight mass spectrometer-timsTof Pro (Bruker Daltonics). Foi adotado o valor de significância de 1%. Foram identificados 63 compostos, sendo que 7 foram encontrados exclusivamente no grupo SS e 10 no grupo controle. Das 240 proteínas presentes em mais de 90% das replicatas biológicas de ao menos um grupo, 15 apresentaram maior abundância na SS, e 3 no grupo controle, das quais duas foram exclusivas. Os grupos foram discriminados por meio de OPLS-DA, em ambas as análises.
Os compostos encontrados na SS estão, em sua maioria, envolvidos com o metabolismo de drogas administradas no controle da doença, e as proteínas de maior abundância na SS fazem parte, principalmente, da resposta imune. Esses resultados podem representar potenciais marcadores no diagnóstico e prognóstico da doença.
(Apoio: FAPs - FAPESP N° 2018/00419-5)
PN1253 - Painel Aspirante
Área: 3 - Controle de infecção / Microbiologia / Imunologia
Apresentação: 10/09 - Horário: 13h00 às 17h30 - Sala: Área dos Painéis
Influência da formulação do azul de metileno na produção de oxigênio singleto na Terapia Fotodinâmica Antimicrobiana (aPDT)
Santos AS, Junqueira HC, Baptista MS, Sabino CP, Bello-Silva MS, Marques MM
ciencias da odontologia UNIVERSIDADE IBIRAPUERA
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse
A terapia fotodinâmica antimicrobiana (aPDT, do inglês antimicrobial photodynamic therapy) é uma forma de descontaminação não invasiva, segura que atinge todos os tipos de microorganismos, inclusive os multirresistentes. Ocorre quando um agente fotossensibilizador (FS) ao ser fotoativado por uma fonte de luz de comprimento de onda adequado , na presença de oxigênio, é capaz de gerar produtos citotóxicos, provocando morte microbiana. Os FSs mais estudados são os derivados fenotiazínicos, entre eles, o azul de metileno (AM). Suas características químicas e veículos podem afetar a eficácia da aPDT, identificar fatores que influenciem este desempenho pode contribuir redução microbiana. O estudo buscou investigar a influência da formulação do AM na produção de substâncias citotóxicas pela aPDT. Foi realizado em duas fases. Fase1: foi avaliada a absorbância e formação de oxigênio singleto (1O2) na aPDT realizada com AM em soluções aquosas em duas concentrações (0,01% e 0,005%). Fase 2: foram comparadas formulações na forma de gel de AM em diferentes veículos (natrosol, carbopol e poloxamer). Os espectros de absorção formam obtidos utilizando um espectrofotômetro, e o rendimento quântico de emissão de 1O2 foi medido pelo monitoramento da intensidade de fosforescência do 1O2 em equipamento emissor de laser com feixe de excitação em 665 nm.
Os resultados preliminares indicam que a concentração, bem como a forma de entrega do AM, são fatores de relevância na capacidade de gerar oxigênio singleto, sendo a formulação do AM um importante fator na obtenção de sucesso com aPDT.
PN1255 - Painel Aspirante
Área: 3 - Cariologia / Tecido Mineralizado
Apresentação: 10/09 - Horário: 13h00 às 17h30 - Sala: Área dos Painéis
Avaliação do DFP na desmineralização da dentina radicular usando modelo de biofilme cariogênico
Soares LP, Ricomini-Filho AP, França K, Cury JA, Tabchoury CPM
Cariologia - Bioquímica FACULDADE DE ODONTOLOGIA DE PIRACICABA
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse
A combinação do efeito físico-químico do fluoreto e do efeito antimicrobiano da prata para a eficácia anticárie do diamino fluoreto de prata (DFP) não é bem esclarecida, o que foi explorado neste estudo. Assim, o efeito do DFP na redução da desmineralização da dentina foi avaliado, usando um modelo de biofilme cariogênico de S. mutans. Blocos hígidos de dentina bovina radicular, com dureza de superfície (DS) conhecida, foram aleatorizados e pré-tratados por 1 min com: I - Controle (sem tratamento); II - DFP (Saforide); III - Solução de NaF (16.800 ppm F) e IV - Solução de AgNO3 (253.870 ppm Ag). Os biofilmes em formação sobre os blocos foram expostos à sacarose 10%, 8x/dia, 3 min. O meio foi trocado 2x/dia, antes do 1o e após o último desafio cariogênico. Após 96 h de crescimento, a DS foi medida novamente para calcular a % de perda de DS (%PDS); cálcio no meio foi dosado. Quantidade acumulada de Ca (μg/cm2 área de dentina) liberado no meio e %PDS foram usados como indicadores da desmineralização. Os dados foram analisados por ANOVA um critério e teste de Tukey (α=5%). Os resultados dos grupos I a IV foram, respectivamente: %PDS: 48,2±10,7a; -5,2±23,2b; 28,8±9,7ab; 25,4±28,6ab; Ca: 1409±278a; 773±70c; 1092±174ab; 923±80bc. O grupo DFP diferiu do controle quanto à %PDS e Ca liberado da dentina (p<0,05). Os grupos NaF e AgNO3 não diferiram do controle quanto à %PDS (p>0,05), mas o grupo AgNO3 diferiu do controle quanto ao Ca liberado (p<0,05).
O modelo de biofilme cariogênico testado é promissor para avaliar o mecanismo de ação do DFP na redução da desmineralização da dentina radicular.
(Apoio: CNPq N° 132649/2020-9 | CAPES N° 001)
PN1256 - Painel Aspirante
Área: 3 - Controle de infecção / Microbiologia / Imunologia
Apresentação: 10/09 - Horário: 13h00 às 17h30 - Sala: Área dos Painéis
Percepção do dentista em relação ao risco de contaminação pelo Sars-Cov2 e avaliação do nível de estresse durante a pandemia
Siqueira BLB, Motta RHL, Ramacciato JC
FACULDADE DE ODONTOLOGIA SÃO LEOPOLDO MANDIC
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse
O objetivo do estudo foi avaliar por meio de um questionário com 16 questões aplicado à 415 dentistas, abordando o nível de conhecimento, mudanças de estratégias de biossegurança e grau de percepção em relação ao risco de contaminação no trabalho durante a pandemia Sars-Cov2. Os resultados foram apurados e quantificados, e os dados foram submetidos aos testes estatísticos. Foram inclusos dentistas atuantes e alunos da faculdade SLMandic e excluídos os questionários incompletos. A amostra mostrou-se jovem e fora do grupo de risco, 77,8% vacinados com a segunda dose e 59,5% clinico geral. Houve um aumento no uso de máscara N95/PFF2, jaleco descartável e protetor facial. O agendamento com horário marcado foi escolhido como a melhor conduta (93,7%). Pela percepção dos partícipes o mais relevante método de transmissão é a exposição à aerossóis gerados os atendimentos (86,5 %) e a odontologia hospitalar foi apontada como de maior risco. Como medida de prevenção de contaminação cruzada 87,5% responderam o uso de óculos e protetor facial, seguida da utilização de máscaras N95 e PFF2 (82.4%) e maior intervalo entre consultas (82,2%). Em uma escala de 0 à 10 foi predominante o grau 5 o nível de estresse com o risco de se contaminar (64,7%), o grau 10 foi atribuído em relação ao medo de transmitirem o vírus para ser familiares (91,0%) e 87,2% ao impacto econômico.
Durante a pandemia houve aumentando de EPIs, mostrando um alto nível de estresse atribuídos ao risco de transmitirem o vírus para os seus familiares e pelo impacto econômico, sendo superiores ao seu próprio risco de contaminação.
PN1257 - Painel Aspirante
Área: 3 - Fisiologia / Bioquimica / Farmacologia
Apresentação: 10/09 - Horário: 13h00 às 17h30 - Sala: Área dos Painéis
Avaliação da fotobiomodulação laser na proliferação de células-tronco mesenquimais de cordão umbilical humano. Estudo in vitro
Deama NS, Miranda JM, Melo EL, Pires CL, Rocha SIS, Silva LBR, Silva MB, Gerbi MEMM
UNIVERSIDADE DE PERNAMBUCO
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse
Células-tronco mesenquimais (CTMs) são células indiferenciadas caracterizadas pela sua capacidade de autorenovação, e diferenciação. Estudos têm demonstrado que o LASER (LBP) acelera o processo de proliferação. O objetivo foi avaliar o potencial de proliferação das CTMs originadas de cordão umbilical cultivadas em meio osteogênico eLBP. Metodologia: Após a coleta do cordão, processamento e a confluência das células, distribuídas em novas garrafas, caracterizando uma passagem. O experimento se deu na terceira passagem, com a contagem do número celular e o plaqueamento. Após 24h, foram divididas em 4 grupos: G1 (crescidas em meio regular); G2 (crescidas em meio osteogênico); G3 (crescidas em meio regular+LBP); G4 (crescidas em meio osteogênico+LBP); os devidos grupos foram irradiados com o LBP 660nm, CW, P-30mW, 2,5J/cm², 10s e acrescido o meio osteogênico. Posteriormente foram adicionados aos poços, solução contendo 0,5 mg MTT, levadas a estufa a 37°C por 4h. As células foram analisadas em intervalos de 24, 48 e 72h.Os dados foram avaliados através dos valores obtidos por poços. Resultados Observou-se através do ensaio MTT que a maior proliferação celular foi do grupo 4, sucessivo do G3 e G1, respectivamente. houve diferença estatística significante (p ≤ 0.05) entre o CONTROLE e os grupos LBP e OSTEO+LBP.
Conclui-se que a maior viabilidade e proliferação das CTMs-CU em experimentos in vitro foi no grupo OSTEO+LBP (grupo 4), mesmo assim, são necessárias mais pesquisas a fim de estabelecer parâmetros e protocolos de irradiação.
PN1258 - Painel Aspirante
Área: 3 - Controle de infecção / Microbiologia / Imunologia
Apresentação: 10/09 - Horário: 13h00 às 17h30 - Sala: Área dos Painéis
Efeito do DESPLAC na formação do biofilme subgengival multiespécies in vitro
Figueiredo NF, Kiausinus KR, Oliveira EG, Feres M, Bueno-Silva B, Figueiredo LC
Periodontia UNIVERSIDADE GUARULHOS
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse
Os produtos naturais são uma alternativa mais sustentável e ecológica. Porém estudos científicos que comprovem suas indicações comerciais são necessários. Neste contexto, o produto DESPLAC (Gel Oral Premium), composto por Aloe Vera, Extrato de Própolis, Chá Verde, Cranberry, Calêndula e Sacarina está disponível no mercado. O objetivo desse estudo foi avaliar o efeito do DESPLAC na formação do biofilme subgengival multiespécie. Durante a formação do biofilme composto de 33 espécies diferentes foram realizados tratamentos 2x/dia (12/12h) durante 1 minuto com: Desplac (teste); Gel Placebo - controle negativo; Noplak Dentifrício - controle positivo (Clorexidina + Cloreto de Cetilpiridíneo); Oral B ProGengiva - controle positivo (Fluoreto de Estanho). Após 7 dias de formação, a atividade antimicrobiana dos produtos foi avaliada por análise colorimétrica e Checkerboard DNA-DNA hybridization. A análise estatística foi realizada por meio do teste de Kruskal-Wallis seguido do post-hoc de Dunn. DESPLAC, Noplak e OralB reduziram 50; 55 e 58 % respectivamente da atividade metabólica dos biofilmes em relação ao placebo e também diminuíram a contagem do patógeno P. gingivalis em relação ao placebo (p≤0,05). DESPLAC, Noplak e OralB reduziram as contagens de 2; 23 e 25 espécies diferentes em relação ao biofilme tratado com placebo (p≤0,05).
O DESPLAC apresentou atividade antimicrobiana contra P. gingivalis, bactéria chave para o desenvolvimento e progressão da doença periodontal.