Efeitos de células-tronco de ratos saudáveis sobre a diferenciação osteoblástica de células-tronco de ratos hipertensos
Freitas GP, Souza ATP, Lopes HB, Weffort D, Oliveira FS, Beloti MM, Rosa AL
Ctbmf - UNIVERSIDADE FEDERAL DE GOIÁS
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse
A hipertensão arterial (HA) é uma doença sistêmica que prejudica a diferenciação osteoblástica de células-tronco mesenquimais (CTMs) e a reparação óssea. Na terapia celular para tratar defeitos ósseos em hipertensos, CTMs de doadores saudáveis (SAU-CTMs) interagem com CTMs de receptores hipertensos (HA-CTMs), então avaliamos, por cocultura indireta, se SAU-CTMs aumentam a diferenciação osteoblástica de HA-CTMs. CTMs foram isoladas da medula óssea de ratos Wistar saudáveis (SAU-CTMs) e de Spontaneous Hypertensive Rats (HA-CTMs). SAU-CTMs foram cocultivadas com HA-CTMs (grupo A) em meio osteogênico e a expressão dos genes marcadores ósseos Runx2, Osx, Alp, Bsp e Oc (n = 4) e atividade de fosfatase alcalina (ALP) (n = 5) foram avaliados aos 10 dias e a mineralização (n = 5), aos 17 dias. Coculturas de SAU-CTMs com SAU-CTMs (grupo B) e HA-CTMs com HA-CTMs (grupo C) foram utilizadas como controles. Os dados foram comparados por ANOVA e Tukey (p≤0,05). A expressão de todos os genes avaliados foi B>A=C (p = 0,001), a atividade de ALP e mineralização foram B>A>C (p = 0,001). Os resultados sugerem que SAU-CTMs recuperam, ao menos parcialmente, o potencial osteogênico de HA-CTMs, indicando que o uso dessas CTMs pode ser uma estratégia interessante nas abordagens de terapia celular para reparar o tecido ósseo em portadores de HA. (Apoio: FAPs - Fundação de Apoio à Pesquisa do Estado de São Paulo N° 2018/13290-0 | FAPs - Fundação de Apoio à Pesquisa do Estado de São Paulo N° 2017/12622-7)AO0115 - Apresentação Oral
Área:
1 - Cirurgia bucomaxilofacial
Membranas de colágeno funcionalizadas com 150 ciclos de deposição de TiO2 otimizam reparo ósseo em calvária de ratos
Barbosa S, Costa MG, Delanora LA, Fonseca-Santos JM, Lima-Neto TJ, Toro LF, Sukotjo C, Faverani LP
Diagnóstico e Cirurgia - UNIVERSIDADE ESTADUAL PAULISTA - ARAÇATUBA
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse
Este estudo in vivo objetivou avaliar o efeito da funcionalização de membranas de colágeno por deposição de TiO2 no reparo de defeitos ósseos críticos em calvária de ratos. Para isso, 36 ratos Wistar foram submetidos à confecção de defeitos críticos em calvária e preenchimento com coágulo sanguíneo (BC), membrana de colágeno (COL), membrana de colágeno funcionalizada com 150 ciclos de camada atômica de TiO2 (COL/150) ou membrana funcionalizada por 600 ciclos (COL/600) de acordo com o grupo experimental (n=6). Aos 7, 14 e 28 dias pós-operatório os animais foram eutanasiados e as peças encaminhadas para escaneamento por Microtomografia Computadorizada (Micro-CT), histologia, para análise do perfil inflamatório e área de osso neoformado, e imunoistoquímica (anti VEGF e OCN). Por meio da microtomografia observou-se que independente da membrana, o volume ósseo foi superior quando comparado ao grupo coágulo. O perfil inflamatório foi caracterizado por uma atividade mais intensa dos grupos teste (COL/150 e COL600) no início do reparo (7 dias), que apresentou queda aos 14 dias e inferioridade quando comparado ao grupo BC (p<0,05). Já aos 28 dias, houve semelhança entre todos os grupos. Com relação a neoformação óssea, o grupo COL/150 apresentou uma superioridade de resultados (p<0,05), que corrobora com a análise imunoistoquímica onde o mesmo apresentou marcação mais intensa para VEGF e OCN. Conclui-se que a funcionalização por 150 ciclo de TiO2 apresentou uma característica osteopromotora e osteocondutora, com importante otimização do reparo ósseo.AO0117 - Apresentação Oral
Área:
1 - Anatomia
Degeneração dos discos intervertebrais: análise da força de mordida e espessura dos músculos mastigatórios
Bettiol NB, Lopes CGG, Cecilio FA, Gonçalves LMN, Regalo IH, Regalo SCH, Siessere S, Palinkas M
Biologia Oral - UNIVERSIDADE DE SÃO PAULO - RIBEIRÃO PRETO
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse
Este estudo teve como objetivo analisar a força de mordida molar máxima e espessura dos músculos masseteres e temporais de indivíduos com e sem a degeneração dos discos intervertebrais. Doze indivíduos adultos, sem disfunção temporomandibular e com diagnóstico de degeneração dos discos intervertebrais confirmado por médicos especialistas foram distribuídos em dois grupos distintos: caso (n=6; idade média de 37,16 ± 1,35 anos; índice de massa corporal médio de 27,09 ± 1,81 Kg/m2) e controle (n=6; idade média de 37,00 ± 2,42 anos; índice de massa corporal médio de 25,92 ± 1,99 Kg/m2). Os grupos foram pareados por idade e índice de massa corporal. O estudo foi aprovado pelo comitê de ética (processo 29014620.1.0000.5419). A força de mordida molar máxima direita e esquerda foi avaliada pelo dinamômetro digital. A espessura dos músculos mastigatórios foi mensurada em repouso e apertamento dental em contração voluntária máxima por meio do ultrassom portátil com transdutor linear de 13 MHz. Não houve diferença significante (p ≤ 0,05; student's t-test) entre os grupos para idade (p = 0,95) e índice de massa corporal (p = 0,67). Não houve diferença significante (p ≤ 0,05) na força máxima de mordida molar máxima e na espessura dos músculos mastigatórios entre os grupos. A doença degenerativa dos discos intervertebrais em adultos não promove modificação na morfologia dos músculos mastigatórios e na força de mordida molar máxima.AO0118 - Apresentação Oral
Área:
1 - Biologia craniofacial
A influência da obesidade na função do sistema estomatognático
Regalo IH, Gonçalves LMN, Vasconcelos PB, Aguiar DAA, Castelo PM, Palinkas M, Regalo SCH, Siessere S
Biologia Básica e Oral - UNIVERSIDADE DE SÃO PAULO - RIBEIRÃO PRETO
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse
A obesidade é um grave problema de saúde pública mundial, com uma estimativa de, em 2025, 2,3 bilhões de adultos estarão com sobrepeso e 700 milhões, obesos. Este é um estudo observacional com indivíduos obesos (Grupo I; n = 20) e eutróficos (Grupo II; n = 20), classificados por meio de exame físico, e pareados por idade, sexo e altura. O objetivo foi avaliar o quanto a obesidade interfere na atividade eletromiográfica dos músculos mastigatórios, na força da língua e dos músculos bucinadores, na espessura muscular e na força máxima de mordida molar. Metodologia: Por meio do eletromiógrafo Delsys Trigno avaliou-se os músculos masseter, temporal, orbicular e supra-hioideo. Para a força da língua e dos músculos bucinadores utilizou-se o IOPI, para a espessura muscular o ultrassom SonoSite NanoMaxx e para a força de mordida o dinamômetro Kratos. Os dados foram analisados estatisticamente pelo teste t independente (SPSS 22.0) após aplicação do teste de normalidade (Shapiro-Wilk) e observação dos gráficos QQ-plot considerando um alfa de 5%. Os dados de IMC, circunferência abdominal e do pescoço foram maiores para os obesos (p<0,01). Os dados eletromiográficos evidenciaram que o grupo obeso apresentou menor atividade em repouso e em contração voluntária máxima, com diferença estatística para os músculos supra-hióideos (p<0,01). Os resultados mostraram que obesos apresentaram espessura muscular, função do bucinador e força de mordida molar maior do que eutróficos (p<0,001). Conclui-se que o fator obesidade influenciou na morfologia e função do sistema mastigatório. (Apoio: FAPs - FAPESP N° 2019/10352-8 | Instituto Nacional de Tecnologia - Medicina Translacional (INCT.TM))AO0119 - Apresentação Oral
Área:
1 - Cirurgia bucomaxilofacial
Efeito do Silenciamento dos Receptores de TNF-α na Diferenciação Osteoblástica de Células-Tronco Derivadas do Tecido Adiposo
Bueno NP, Bighetti-Trevisan RL, Sanchez GZ, Oliveira FS, Freitas GP, Beloti MM, Ferraz EP
Cirurgia, Prótese e Traumatologia - UNIVERSIDADE DE SÃO PAULO - SÃO PAULO
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse
O potencial osteogênico reduzido das células-tronco mesenquimais derivadas do tecido adiposo (CTM-TA) pode ser atribuído ao efeito autócrino do fator de necrose tumoral alfa (TNF-α). Para investigar nossa hipótese, CTM-TA de ratos foram mantidas em meio osteogênico e submetidas ao silenciamento dos genes receptores de TNF-α (Tnfr1, Tnfr2 e Tnfr1/r2) utilizando siRNAs (Dharmacon). CTM-TA Scramble foram utilizadas como Controle. A diferenciação osteoblástica foi avaliada pela expressão gênica e proteica de fosfatase alcalina (ALP) e do fator de transcrição RUNX2 (PCR em tempo real e Western Blot), e pela atividade de ALP in situ. Os dados foram comparados por Kruskal-Wallis (p≤0,05). A eficiência do silenciamento foi de 90% após 24h e 50% após 7 dias de transfecção. A expressão dos genes Alp e de Runx2 foi maior nas células silenciadas em relação ao Controle aos 3, 5 e 7 dias e 1, 3 e 5 dias, respectivamente (p<0,001, para ambos genes e tempos). A expressão proteica de ALP e RUNX2 foi maior aos 3 dias nas células silenciadas em relação ao Controle, e aos 5 e 7 dias nota-se diminuição da expressão das proteínas em todos os grupos. Há aumento da atividade de ALP das células silenciadas comparado ao Controle, mais evidente quando ambos os receptores foram silenciados (p<0,01). Os dados sugerem o papel do TNF-α endógeno na diferenciação osteoblástica de CTM-TA, o que poderá contribuir no desenvolvimento de estratégias de ativação celular para potencializar o reparo de defeitos ósseos. (Apoio: FAPESP N° 18/04655-5 | FAPESP N° 19/14680-0)AO0120 - Apresentação Oral
Área:
1 - Cirurgia bucomaxilofacial
Alfabetismo em saúde bucal e fatores centrados no paciente antes e após a remoção de terceiros molares
Reis GES, Alves AK, Sommerfeld R, Costa DJ, Rebellato NLB, Assunção LRS, Feltrin-Souza J., Scariot R
Estomatologia - UNIVERSIDADE FEDERAL DO PARANÁ
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse
Este estudo prospectivo observacional, conduzido em indivíduos submetidos a cirurgia para remoção de terceiros molares objetivou investigar se o alfabetismo em saúde bucal (ASB) está associado a fatores centrados no paciente, incluindo: percepção do desconforto cirúrgico, qualidade de vida relacionada com a saúde oral (OHRQoL) e ansiedade. Foram incluídos 194 participantes, entre 18 e 64 anos, atendidos na disciplina de Cirurgia da Universidade Federal do Paraná, durante o período de um ano. O ASB foi avaliado utilizando a versão brasileira do instrumento Rapid Estimate of Adult Literacy in Dentistry (BREALD-30) antes da cirurgia por um examinador calibrado (kappa ≥0,915). A OHRQoL foi avaliada utilizando o questionário Perfil de Impacto na Saúde Oral (OHIP-14) e a Ansiedade Dentária foi avaliada utilizando o instrumento IDATE, ambos os instrumentos foram aplicados antes do procedimento cirúrgico. A intensidade do desconforto cirúrgico foi estimada através do questionário QCirDental, aplicado após a cirurgia. A análise estatística foi realizada com um nível de significância de 5%. Baixos níveis de ASB foram correlacionados com níveis mais baixos de OHRQoL (p=0,002). Indivíduos casados (p=0,040), nível educacional inferior (p<0,001) e renda mais baixa (p=0,02) foram fatores associados a níveis mais baixos de ASB. Indivíduos ansiosos com maior percepção de desconforto durante a cirurgia não estavam relacionados com níveis mais baixos de ASB. Os nossos resultados sugerem que as variáveis sociodemograficas e a OHRQoL estão associadas ao ASB. (Apoio: CAPES N° 001)AO0121 - Apresentação Oral
Área:
1 - Biologia craniofacial
Efeito de agrin na diferenciação osteoblástica de células-tronco mesenquimais
Lopes HB, Souza ATP, Oliveira FS, Weffort D, Freitas GP, Adolpho LF, Rosa AL, Beloti MM
Dctbmfp - UNIVERSIDADE DE SÃO PAULO - RIBEIRÃO PRETO
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse
A inibição da proteína de matriz extracelular agrin endógena reduz a diferenciação osteoblástica por regular negativamente as vias de sinalização de Wnt e BMP. Nesse cenário, estabelecemos a hipótese de que o tratamento com agrin recombinante favorece a diferenciação osteoblástica, ativando as vias de Wnt e BMP. Células-tronco mesenquimais de medula óssea de camundongos (MSCs), células derivadas da calvária de camundongos e células osteoblásticas da linhagem MC3T3-E1 foram tratadas com diferentes concentrações de agrin e a expressão gênica de marcadores ósseos foi avaliada por PCR em tempo real para seleção das células e da concentração de agrin utilizadas nos experimentos seguintes. Em seguida, MSCs foram cultivadas em meio osteogênico na presença de agrin (50 ng/mL) ou do veículo (controle) por até 10 dias e foram avaliadas: expressão gênica, por PCR em tempo real (n=3), de agrin e seus receptores, Lrp4 e Dag1, dos marcadores ósseos, Runx2, Sp7, Ibsp e Bglap e de marcadores das vias de Wnt e BMP, expressão proteica de RUNX2 por Western blotting (n=3) e atividade de fosfatase alcalina (ALP, n=5). Os dados foram comparados por teste-t ou ANOVA (p≤0,05). O tratamento com agrin inibiu sua expressão gênica e aumentou a expressão de Lrp4, Runx2, Sp7, Ibsp e Bglap, a expressão proteica de RUNX2 e a atividade de ALP, sem afetar a expressão de genes relacionados às vias de Wnt e BMP. Assim, demonstramos que agrin favorece a diferenciação osteoblástica de MSCs, tornando essa proteína um alvo potencial para o desenvolvimento de novas terapias para tratar doenças e lesões ósseas. (Apoio: FAPESP N° 2017/20349-9 e 2019/01344-1 | CAPES N° 2016/14171-0 | CNPq N° 303464/2016-0)AO0123 - Apresentação Oral
Área:
2 - Terapia endodôntica
Análise por Micro-CT da reabsorção óssea em ratos portadores de periodontite apical induzida suplementados com curcumina
Justo MP, Cardoso CBM, Cantiga-Silva C, Cosme-Silva L, Oliveira PHC, Conti LC, Duarte MAH, Cintra LTA
Odontologia Preventiva e Restauradora - UNIVERSIDADE ESTADUAL PAULISTA - ARAÇATUBA
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse
O objetivo deste trabalho foi analisar o processo de reabsorção óssea em ratos com periodontite apical suplementados com curcumina, por meio da análise em microtomografia computadorizada (Micro-CT). Foram adquiridos 40 ratos, distribuídos em 4 grupos de 10 animais cada: C - ratos controle, PA - ratos com periodontite apical; CUR - ratos suplementados com curcumina e PA+CUR - ratos com periodontite apical e suplementados com curcumina. A PA foi induzida por meio da exposição pulpar ao meio oral dos primeiros molares superiores direito. Os animais receberam a curcumina pelo método da gavagem durante 15 dias antes e 30 dias após a indução da PA. Após este período, os animais foram eutanasiados e as hemimaxilas foram removidas e scaneadas para então serem reconstruídas com uso do software NRecon. Os planos foram ajustados utilizando o software Data Viewer e o volume das lesões periapicais foi analisado e utilizado para determinar o efeito da suplementação com curcumina. Testes estatísticos foram aplicados (p<0,05). O grupo PA apresentou média de volume de perda óssea periapical de 2,18 ± 0,99 mm3, enquanto o grupo PA+CUR apresentou 1,88 ± 0,52mm3. Não foram observadas diferenças do ponto de vista estatístico (p>0,05). Conclui-se que que a suplementação alimentar com a curcumina não influenciou o processo de reabsorção óssea de lesões periapical induzidas no período de 30 dias. Conclui-se que que a suplementação alimentar com a curcumina não influenciou o processo de reabsorção óssea de lesões periapical induzidas no período de 30 dias. (Apoio: FAPESP N° 2018/18661-7)AO0124 - Apresentação Oral
Área:
2 - Terapia endodôntica
Impacto do acesso ultraconservador na instrumentação, obturação e resistência à fratura de molares submetidos à ciclagem termomecânica
Lima CO, Barbosa AFA, Ferreira CMA, Ferretti MA, Aguiar FHB, Sassone LM, Fidel SR, Silva EJNL
Odontologia - UNIVERSIDADE FEDERAL DE JUIZ DE FORA
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse
Este estudo avaliou o impacto do acesso ultraconservador (UltraAC) na instrumentação, na obturação e na resistência à fratura de molares inferiores após o preparo do canal com XP-endo Shaper (XP) ou Reciproc (RC), em condições clínicas simuladas. O acesso tradicional (TradAC) foi usado como comparação. 40 molares foram escaneados por microtomografia e divididos em 4 grupos de acordo com o acesso e instrumentação (n=10): TradAC/RC, TradAC/XP, UltraAC/RC e UltraAC/XP. Após a instrumentação e obturação dos canais, os dentes foram reescaneados e avaliados no programa ImageJ. Após a restauração coronária, os dentes foram submetidos à ciclagem termomecânica e a resistência à fratura. O teste ANOVA foi usado para a análise estatística (P<0,05). A área não-preparada do canal foi menor nos grupos TradAC (P<0,05), independentemente do instrumento utilizado. O grupo UltraAC/XP removeu menor volume de dentina radicular (P<0,05). Os grupos UltraAC/XP e TradAC/XP apresentaram menor acúmulo de debris (P<0,05) e o TradAC/XP menor transporte do canal (P <0,05). Os grupos UltraAC demonstraram maior porcentagem de espaços vazios e de material na câmara pulpar após a obturação (P <0,05). Não houve diferença na resistência à fratura entre os grupos (P <0,05). Os grupos UltraAC demonstraram piores resultados na área não preparada, volume de espaço vazio e material obturador na câmara pulpar. O UltraAC/XP teve menor remoção de dentina e menor acúmulo de debris, enquanto o TradAC/XP teve menor transporte de canal. Não houve diferença na resistência à fratura entre os grupos. (Apoio: CAPES N° 001)AO0127 - Apresentação Oral
Área:
2 - Biologia pulpar
Síntese e avaliação biológica de scaffold bicamada de quitosana e aluminato de cálcio em modelo in vitro de capeamento pulpar direto
Mendes-Soares IP, Leite MLAS, Mon FKW, Cassiano FB, Soares DG, de-Souza-Costa CA, Hebling J
Materiais Odontológicos e Prótese - UNIVERSIDADE ESTADUAL PAULISTA - ARARAQUARA
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse
O objetivo deste estudo foi desenvolver scaffolds bicamada de quitosana (QT) incorporados ou não com aluminato de cálcio (AlCa) e avaliar o efeito sobre células pulpares humanas (HDPCs) com ou sem o recobrimento com cimento de ionômero de vidro (CIV), simulando o capeamento pulpar direto (CPD). Scaffolds bicamada foram obtidos pela integração de uma camada densa (CD) sobreposta a outra macro porosa (CMP). Soluções de 2% QT contendo ou não 1% AlCa foram utilizadas para produzir a CMP, e para a CD, foi utilizada solução de 5% QT e 2% AlCa. Os scaffolds foram caracterizados em MEV. Para simular o CPD, discos de dentina humana foram perfurados centralmente e adaptados em câmaras pulpares artificiais. HDPCs foram cultivadas sobre a CMP e sobre a CD foi aplicado ou não CIV Ketac Molar Easymix. Assim, 4 grupos foram avaliados (n=8): QT (controle), QT-AlCa, QT+CIV e QT-AlCa+CIV. HDPCs foram avaliadas quanto à viabilidade (alamarBlue; Live/Dead), adesão/espalhamento (F-actina), expressão gênica (RT-qPCR) e deposição de nódulos mineralizados (Alizarin Red). Os dados foram submetidos a ANOVA/Tukey (α=5%). Todas as formulações apresentaram integração entre as camadas. A incorporação de AlCa aumentou o tamanho e a quantidade de poros. QT-AlCa e QT-AlCa+CIV favoreceram similarmente a viabilidade, adesão/espalhamento celular, expressão de ALPL, DSPP e DMP1, e a deposição de nódulos mineralizados. Em conclusão, scaffolds bicamada de QT foram citocompatíveis independentemente da associação com CIV e a presença de AlCa intensificou a expressão do fenótipo odontogênico de HDPCs. (Apoio: FAPs - FAPESP - MS N° 2019/07400-0 | FAPs - FAPESP - AR N° 2017/22739-9 | CNPq N° 303391/2019-7)