Scaffold de quitosana com superfície de nanoglóbulos de betaglicerofosfato-cálcio: uma estratégia cell-homing de engenharia da dentina
Bordini EAF, Cassiano FB, Bronze-Uhle ES, Álamo L, Hebling J, de-Souza-Costa CA, Soares DG
Materiais Dentários e Prótese - UNIVERSIDADE DE SÃO PAULO - RIBEIRÃO PRETO
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse
O objetivo deste trabalho foi desenvolver scaffolds bioativos de quitosana, visando seu emprego em estratégias cell-homing para regeneração dentinária. Scaffolds de quitosana (CH) contendo hidróxido de cálcio (Ca) e betaglicerofosfato (βGP) foram preparados. Caracterização físico-química (MEV, EDS, FTIR, perda de massa, grau de porosidade), biológica a distância (extratos) e de contato direto foram realizadas. Potencial cell-homing foi testado em modelo pulp-in-a-chip, onde scaffolds sem células foram cultivados justapostos a uma cultura 3D de células pulpares humanas (DPCs) sob pressão intra-pulpar simulada. Viabilidade celular (Alamar blue, Live/Dead), adesão/espalhamento (F-actina), migração celular (transwell), deposição cálcio/matriz mineralizada (o-cresolftaleína/Alizarin red), atividade de ALP (ponto final) e expressão de DSP (imunofluorescência) foram avaliados (n=6; ANOVA/Tukey; α=5%). A incorporação de Ca e βGP ao scaffold CH permitiu formação de superfície porosa contendo nanoglóbulos de cálcio e fosfato (CH-Ca-βGP), com degradação controlada. Este scaffold permitiu viabilidade e estimulou a diferenciação celular (ALP e mineralização) e quimiotaxia após avaliação biológica dos extratos e cultivo direto. O ensaio pulp-in-a-chip demonstrou seu potencial em mobilizar células da cultura 3D para sua superfície e induzir expressão de DSP e matriz mineralizada (p<0,05). Concluiu-se que CH-Ca-βGP estimula expressão do fenótipo odontoblástico de DPCs, apresentando potencial aplicação para regeneração da dentina. (Apoio: FAPESP N° 2017/20181-0 | FAPESP N° 2016/15674-5)